UUO模型大鼠腎間質(zhì)纖維化相關(guān)炎癥因子抗體芯片分析.pdf

1、目的:采用抗體芯片技術(shù)檢測(cè)在大鼠腎間質(zhì)纖維化形成過程中腎組織炎癥因子的整體變化情況,以篩選出更多可能與腎間質(zhì)纖維化進(jìn)程相關(guān)的炎癥因子,并通過進(jìn)一步研究,深入了解這些炎癥因子的作用,有助于闡明腎間質(zhì)纖維化的機(jī)制,進(jìn)而為臨床防治慢性腎病提供新的方向。
　　 方法:將50只清潔級(jí)SD雄性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(SOR)和單側(cè)輸尿管結(jié)扎組(UUO)。隨機(jī)選取各組中的5只大鼠分別于單側(cè)輸尿管結(jié)扎術(shù)后第5天、7天、11天、14天和21天處死,

2、取血5 ml監(jiān)測(cè)腎功能的變化,收集患側(cè)腎組織觀察梗阻腎的病理學(xué)改變。以此確定腎間質(zhì)纖維化過程中腎臟改變最具代表性的時(shí)間點(diǎn),再將該時(shí)間點(diǎn)的腎臟組織做細(xì)胞因子抗體芯片檢測(cè),觀察19種炎癥因子在腎間質(zhì)纖維化進(jìn)程中的動(dòng)態(tài)變化。在此基礎(chǔ)上,選用辛伐他汀進(jìn)行藥物干預(yù),觀察辛伐他汀對(duì)Fractalkine及受體CX3CR1的影響。將15只SD雄性大鼠隨機(jī)分成3組:SOR組、UUO組、治療組(UUO+辛伐他汀組),每天給予辛伐他汀(5mg／d)灌胃,假

3、手術(shù)組、UUO組和治療組均在術(shù)后第14天處死后取左側(cè)腎臟,觀察梗阻腎的病理學(xué)變化。
　　 結(jié)果:與假手術(shù)組相比,UUO組術(shù)后第5天,腎臟組織出現(xiàn)早期纖維化的病理改變。隨著梗阻時(shí)間延長,患側(cè)腎功能逐漸減退,小管間質(zhì)纖維化程度進(jìn)行性加重,于術(shù)后第14天,病變最典型。利用抗體芯片技術(shù)檢測(cè)各組腎組織中19種炎癥因子的變化情況,有17種炎癥因子不同程度出現(xiàn)增高或降低,其中Fractalkine、GM-CSF、IL-1α、IL-1β、IL-

4、6、IFN-γ、LIX、Leptin、MCP-1、MIP-3α、TIMP-1和TNF-α共12種炎癥因子隨腎間質(zhì)纖維化程度加重呈增高的趨勢(shì),尤以MCP-1、Fractalkine和FIMP-1增高最為明顯(P<0.05)；IL-4和IL-10表現(xiàn)為下降趨勢(shì)(P<0.05)；VEGF、CINC-2和CINC-3表現(xiàn)為先升高后降低的變化趨勢(shì)(P<0.05)；CNTF和β-NGF這2種炎癥因子無明顯變化。用辛伐他汀治療后第14天,與假手術(shù)組相

5、比,模型組和治療組腎組織纖維化明顯,治療組的腎間質(zhì)纖維化程度輕于模型組。
　　 結(jié)論:單側(cè)輸尿管結(jié)扎可以迅速建立理想的腎臟細(xì)胞轉(zhuǎn)分化和腎間質(zhì)纖維化大鼠模型,且腎間質(zhì)纖維化程度隨腎功能的減退進(jìn)行性加重?？贵w芯片檢測(cè)結(jié)果以MCP-1、Fractalkine和TIMP-1變化最為明顯,說明這三種炎癥因子在腎間質(zhì)纖維化進(jìn)程中發(fā)揮的促纖維化作用最大。Fractalkine作為我們篩選出的重要細(xì)胞因子之一,其機(jī)制和作用尚未被完全研究清楚,而