青蒿琥酯對(duì)UUO模型大鼠腎間質(zhì)纖維化抑制作用及其機(jī)制研究.pdf

1、腎間質(zhì)纖維化(RIF)是各種不同病因的慢性腎臟病(CKD)隨著病程進(jìn)展進(jìn)入終末期腎病(ESRD)的一個(gè)進(jìn)行性、不可逆的共同途徑。青蒿琥酯是我國(guó)獨(dú)立創(chuàng)制且首次得到國(guó)際承認(rèn)的經(jīng)典抗瘧藥。目前研究認(rèn)為該藥具有抗纖維化作用。本研究通過(guò)將青蒿琥酯應(yīng)用于大鼠單側(cè)輸尿管結(jié)扎(UU0)腎間質(zhì)纖維化模型，觀察青蒿琥酯能否延緩腎間質(zhì)纖維化，并初步探索其機(jī)制。 方法：將雄性Wistar大鼠80只隨機(jī)分為5組，平均每組16只：假手術(shù)組(SOR)、UU0

2、模型對(duì)照組(UUO)、青蒿琥酯小劑量組(SDA)、青蒿琥酯大劑量組(LDA)和科素亞組(ARB)。從術(shù)后24小時(shí)開(kāi)始對(duì)大鼠灌胃：SDA組和LDA組分別給予青蒿琥酯25mg/kg／d、50mg/gk/d；ARB組給予科素亞20mg/kg／d；SOR組和UUO組給予同等體積的生理鹽水。術(shù)后3天、7天、14天和21天每組隨機(jī)選擇4只大鼠測(cè)體重、收集24小時(shí)尿、血和腎組織標(biāo)本。標(biāo)本收集完后一次性檢測(cè)24小時(shí)尿蛋白總量、血肌酐；免疫組化檢測(cè)腎組織

3、中結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP-7)和Smad6表達(dá)：原位雜交觀察腎組織BMP-7和Smad6 mRNA表達(dá)和定位。單因素方差分析比較組間各個(gè)因子表達(dá)差異：用SNK進(jìn)行組間兩兩比較。用相關(guān)分析了解腎間質(zhì)各因子表達(dá)之間及其與腎間質(zhì)損傷的關(guān)系。 結(jié)果：①不同時(shí)間點(diǎn)各組24h尿蛋白總量無(wú)差異(P>0.05)；動(dòng)態(tài)觀察同一組各時(shí)間點(diǎn)24小時(shí)尿蛋白總量無(wú)變化(P>0.05)。②U

4、U0組術(shù)后3天、7天、14天血肌酐均高于SOR組和其它治療組(P<0.05)，術(shù)后21天五組間無(wú)差異(P>0.05)；各治療組在不同時(shí)間點(diǎn)血肌酐無(wú)差異(P>0.05)。③SOR組腎臟病理無(wú)異常；UU0組腎間質(zhì)損傷和炎細(xì)胞浸潤(rùn)各時(shí)間點(diǎn)均較SOR組和各治療組嚴(yán)重(P<0.05)；各治療組間無(wú)差異(P>0.05)。④ SOR組中CTGF微量或無(wú)表達(dá)，α-SMA僅在小動(dòng)脈表達(dá)；UU0組隨梗阻加重，CTGF、α-SMA表達(dá)增多，但術(shù)后21天有所降

5、低；各治療組 CTGF、α-SMA表達(dá)在各時(shí)間點(diǎn)均低于UUO組(P<0.05)。⑤BMP-7、Smad6的蛋白及mRNA在SOR組中高度表達(dá)；UUO組隨梗阻加重其表達(dá)逐漸下降；LDA和ARB組在各時(shí)間點(diǎn)其表達(dá)均高于UUO組(P<0.05)，兩組間無(wú)差異(P>0.05)；與UUO組相比，SDA組在梗阻早期表達(dá)無(wú)增加，梗阻后期表達(dá)增多，但低于LDA和ARB組(P<0.05)。⑥BMP-7 表達(dá)與CTGF、α-SMA表達(dá)、間質(zhì)相對(duì)面積呈負(fù)相關(guān)

6、，而與Smad6表達(dá)呈正相關(guān)；Smad6表達(dá)與CTGF、α-SMA表達(dá)、間質(zhì)相對(duì)面積呈負(fù)相關(guān)；CTGF表達(dá)與α-SMA表達(dá)、間質(zhì)相對(duì)面積呈正相關(guān)；α-SMA表達(dá)與間質(zhì)相對(duì)面積呈正相關(guān)。 結(jié)論：①單側(cè)輸尿管結(jié)扎(UUO)可以快速建立腎間質(zhì)纖維化模型。②腎間質(zhì)纖維化與CTGF表達(dá)增多、BMP-7和Smad6表達(dá)減少密切相關(guān)。③青蒿琥酯可以減輕腎間質(zhì)損傷和炎細(xì)胞浸潤(rùn)。④青蒿琥酯可以明顯抑制CTGF表達(dá)、促進(jìn)BMP-7和Smad6表達(dá)