茄子反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子分子標(biāo)記IRAP和REMAP的開發(fā)利用.pdf

1、茄子(SolanummelongenaL.2n=24)是世界上重要的蔬菜作物，我國是全球茄子栽培面積最大、產(chǎn)量最多的國家，且近年來栽培面積逐年增長，在蔬菜生產(chǎn)中占有越來越重要的位置。為了提高茄子育種水平，育種工作者都努力從分子水平上掌握資源的遺傳信息。 反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子以高拷貝形式廣泛存在于植物基因組中，異質(zhì)性高，在種內(nèi)和種間表現(xiàn)出較高的序列差異性和豐富的插入多態(tài)性。由于這些特點，使其作為一種分子標(biāo)記得以應(yīng)用，并越來越受到重視，IR

2、AP和REMAP就是兩種基于反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的分子標(biāo)記技術(shù)。 本研究以35份茄子為試材，應(yīng)用幾種Copia類型的反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子進行引物設(shè)計，首次建立了茄子IRAP和REMAP分子標(biāo)記技術(shù)體系，兩種方法都得到了多態(tài)性豐富的指紋圖譜，并對供試材料進行了基于IRAP的遺傳多樣性分析。獲得主要結(jié)論如下： 1、根據(jù)煙草的反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子Tnt1和大麥反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子Bare-1的LTR保守區(qū)域設(shè)計引物，開發(fā)出了茄子基于反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的分子標(biāo)記IR

3、AP和REMAP，并以引物P1-1進行了反應(yīng)體系的優(yōu)化。 2、以優(yōu)化后的反應(yīng)體系對供試材料進行擴增，得到了基于IRAP和REMAP的獨特著紋圖譜，可以作為區(qū)分不同品種的依據(jù)。 3、對35份栽培品種進行了基于IRAP的遺傳多樣性分析，根據(jù)Tnt1,Ttol，Tnd-1和Bare-1設(shè)計的6個引物共擴增出195條帶，多態(tài)性帶179條，多態(tài)性比率平均為91.8％，Nei’s遺傳相似系數(shù)為基礎(chǔ)利用NTSYS程序從分子水平上將供試