基于remap和irap分子標(biāo)記的梅(prunusmumesieb.etzucc.)遺傳多樣性分析

1、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文基于REMAP和IRAP分子標(biāo)記的梅（Prunus mume Sieb.etZucc.）遺傳多樣性分析姓名：沈玉英申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：果樹(shù)學(xué)指導(dǎo)教師：章鎮(zhèn)201012基于R E M A P 和I 砒”分子標(biāo)記的梅( 尸h 九淞胍“腳P S i c b ．e tz u c c ．) 遺傳多樣性分析共產(chǎn)生1 2 2 個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)。5 對(duì)引物組合的香濃信息指數(shù)，在0 ．3 8 9 7 ．O ．6 3 6 4 之間，

2、N e i ’s遺傳多樣性指數(shù)脅在0 ．2 3 9 5 ．O ．4 4 5 5 之間；對(duì)I 也M A P 擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行U P G M A 聚類(lèi)，在相似系數(shù)o ．7 6 6 處，8 4 個(gè)梅品種可分為1 8 組，果梅與花梅分別聚類(lèi)；‘小葉豬肝’與‘大葉豬肝’呈現(xiàn)出明顯的多態(tài)性，‘小葉豬肝’在1 9 8 b p 和6 0 0b p 出現(xiàn)多態(tài)性位點(diǎn)。用P o p G e n 3 2 分析梅遺傳多樣性，推測(cè)日本果梅可能引自中國(guó)浙江，日本花梅引自

3、中國(guó)江蘇；花瓣3 層是梅花瓣數(shù)量引起遺傳變異的起點(diǎn)，3 ．5 層間遺傳基本穩(wěn)定，果梅花瓣1 層、花梅花瓣5 層具有較明顯的遺傳多樣性。品種間的遺傳距離，8 4 個(gè)梅品種中，最近的是‘雙粉垂枝’與‘粉皮宮粉’為O ．0 5 9 ，最遠(yuǎn)的是‘云南紅梅’與‘大?！癁? ．6 3 0 ；果梅品種中，最近的是‘黃小大’與‘福建白粉’為O ．1 0 4 ，最遠(yuǎn)的是‘四月梅’與‘信儂小梅’為0 ．4 8 7 ；花梅品種中，最近的是‘雙粉垂枝’與‘粉皮

4、宮粉’為O ．0 5 9 ，最遠(yuǎn)的是‘中玉宮粉’與‘云南豐后’為0 ．5 5 6 ?；蛄鲝?qiáng)度的群體每代遷移數(shù)梅品種群最大。3 ．基于I m 心標(biāo)記技術(shù)的梅遺傳多樣性分析通過(guò)5 因素4 水平L 1 6 ( 4 5 ) 的完全隨機(jī)正交試驗(yàn)、不同濃度P A G E 膠等的研究，建立了適合梅R A P 標(biāo)記的技術(shù)體系。體系總體積2 5 山：基因組D N A 3 0 n g ，2 ．5m m o 兒M g C l 2 2 ．0 皿，2 ．5m

5、m o 忱d N T P s 2 ．5 此，1 0 ×B 啦r2 ．5 此，№D N A 聚A 酶1 ．O U ，1 0I I m o l ／I ?？Ъ阂? ．O 斗L ，加d d H 2 0 至2 5 肛L6 ％和8 ％濃度的非變性P A G E 膠適于m A P 多態(tài)性檢測(cè)。篩選出6 條L 1 R 引物，用于8 4 個(gè)梅品種的瓜A P 遺傳多樣性分析，共產(chǎn)生9 9 個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)。6 條引物的香濃信息指數(shù)，在O ．3 3

6、5 9 ．O ．5 8 0 7 ，N e i ’s 遺傳多樣性指數(shù)脅在0 ．1 9 6 7 ．0 ．3 9 7 6 之間；對(duì)m A P 擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行U P G M A 聚類(lèi)，在相似系數(shù)O ．7 6 6 處，8 4 個(gè)梅品種聚為4 1 組，果梅的1 長(zhǎng)農(nóng)1 7 ’與花梅宮粉型的‘粉皮宮粉’，‘香雪宮粉’，‘云南紅梅’，‘小玉宮粉’聚一起，花梅的‘美人梅’與果梅的‘信儂小梅’聚一起，其余都是果梅與花梅分別聚類(lèi)。日本果梅品種的‘玉英’、‘白加

7、賀’、‘月世界’、‘古城’、‘節(jié)田梅’，‘花香實(shí)’聚在一起．‘大葉豬肝’與‘小葉豬肝’不聚在一組。應(yīng)用P o p G e n 3 2 分析了梅遺傳多樣性，日本、江蘇、浙江品種群親緣關(guān)系最近，推測(cè)日本果梅引自中國(guó)浙江，日本花梅引自中國(guó)江蘇；花瓣3 層是梅花瓣數(shù)量變異引起遺傳變異的起點(diǎn)，3 ．5 層間遺傳基本穩(wěn)定。8 4 個(gè)梅品種的遺傳距離，最近的是爭(zhēng)白加賀’和‘月世界’為0 ．1 0 7 ，也是果梅中最近的，最遠(yuǎn)的是‘甲州小梅’和‘骨紅垂