薏苡胚油脂分子標記鑒定及遺傳多樣性分析.pdf

1、薏苡（Coix lacryma-jobi L.）有著“世界禾本科之王”、“世界健康之禾”的美譽。薏苡為藥、食兩用植物，以薏苡中性油脂作主要成分的特效抗癌藥“康萊特注射液”，是目前唯一一個獲得美國FDA認可的中草藥，現(xiàn)在已經(jīng)進入Ⅲ期臨床。薏苡作為小物種，NCBI數(shù)據(jù)庫目前沒有它的基因組序列信息，由于缺乏優(yōu)良的薏苡品種，加上國內(nèi)很少人從事薏苡分子育種改良種質(zhì)資源相關(guān)工作，造成薏苡胚油脂含量有效檢測存在很大困難，缺乏有效檢測方法和技術(shù)手段。本

2、研究主要目的，是通過 RAPD分子標記鑒定薏苡胚油脂性狀，嘗試找到控制薏苡胚油脂含量的分子標記并進行鑒定，并對所收集的23種薏苡（LG001~LG023）種質(zhì)資源的遺傳多樣性進行分析，為改良薏苡胚油脂含量種質(zhì)，對薏苡分子育種相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)。
　　本論文通過RAPD分子標記技術(shù)對23個供試薏苡品種進行了遺傳多樣性分析，對胚油脂含量較高的薏苡品種進行了標記。從256條RAPD引物中篩選出來34條多態(tài)性豐富的RAPD引物，對23個供試

3、薏苡品種基因組進行RAPD擴增，結(jié)果共獲得405個多態(tài)性片段。采用UPGMA聚類分析法，以RAPD遺傳系數(shù)0.75為標準，23種供試薏苡分為5類，第I類包括LG012（黃白色）、LG004（棕色）；第II類包括LG013（黃白色）、LG015（黑褐色）、LG023（黃白色）、LG007（黑褐色）、LG009（黃白色）、LG014（黃白色）、LG002（黃白色）、LG022（黃白色）、LG005（黑褐色）、LG003（黃白色）、LG016

4、（深棕色）、LG011（深棕色）；第III類包括LG021（棕色）、LG008（灰色）；第Ⅳ類包括LG017（黃白色）、LG018（黑褐色）、LG001（深棕色）；第Ⅴ類包括LG019（黃白色）、LG020（棕色）、LG006（深棕色）、LG010（黃白色）。這個實驗結(jié)果與23份薏苡地理來源、種質(zhì)系譜相符合。實驗結(jié)果顯示23份供試薏苡RAPD遺傳系數(shù)相似，變幅值在0.55-0.96，LG013品種薏苡的遺傳系數(shù)為0.87。LG013是這

5、23種薏苡里面最優(yōu)品種，在這23種薏苡品種中，LG013具有最大果長11.222mm，最大果寬10.148mm，最大果高8.194mm，最大種長10.69mm，最大種寬8.315mm，最大種高6.68mm，最大胚油脂含量0.00875g，最大胚含油脂百分數(shù)8.99％。LG013是23份薏苡中胚油脂含量最高的品種達8.99%，23份供試薏苡的胚油脂含量在1.75%-8.99%，平均值僅為3.47%。LG013在第400個多態(tài)性分子標記處，

6、S44引物（序列信息TCTGGTGAGG）的擴增結(jié)果中1050bp處有唯一特異條帶，其它品種薏苡1050bp均沒有條帶。據(jù)此設(shè)計特殊引物F:TCTGGTGAGGGG AGTCACA，R:TCTGGTGAGGCATGGTGT，利用特殊引物F/R分子標記鑒定結(jié)果表明，LG013有600bp特異性條帶，引物F/R可用于LG013品種的鑒定及高含量胚油脂性狀的分子鑒定。這些數(shù)據(jù)將會為薏苡種質(zhì)資源改良研究，薏苡分子育種及薏苡其它重要性狀研究提供一