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文檔簡介
1、目的：我們的前期研究證明慢性心力衰竭(chronicheartfailure,CHF)患者調(diào)節(jié)性T(Treg)細(xì)胞數(shù)目和功能存在缺陷。然而,其缺陷的機制尚未明確。本研究力圖探究CHF患者Treg細(xì)胞缺陷的原因。
方法：本研究納入95名研究對象,其中包括52名CHF患者(包括20名缺血性心衰(IHF)患者和32名非缺血性心衰(NIHF)患者)和43名非CHF對照。留取外周血標(biāo)本后,密度梯度離心法制備單個核細(xì)胞(PBMC)懸液,流
2、式細(xì)胞分析法分析CD4+CD25+FOXP3+CD45RO-CD45RA+初始性Treg(naiveTreg,nTreg)細(xì)胞、CD4+CD25+FOXP3+CD45RO+CD45RA-記憶性Treg(memoryTreg,mTreg)細(xì)胞和CD4+CD25+FOXP3+CD45RO-CD45RA+CD31+胸腺輸出初始性Treg(recentthymicemigrant-Treg,RTE-Treg)細(xì)胞的數(shù)量。免疫磁珠分離法獲得純化的
3、Treg細(xì)胞,RT-PCR分析Treg細(xì)胞中T細(xì)胞受體刪除環(huán)(T-cellreceptorexcisioncircles,TRECs)的含量。AnnexinV和7-AAD雙染法檢測Treg細(xì)胞的自發(fā)凋亡和誘導(dǎo)性凋亡情況。ELISA法檢測血漿中sCD95L的水平。
結(jié)果：與非CHF對照比較,CHF患者1.外周血中的nTreg細(xì)胞和mTreg細(xì)胞數(shù)目顯著減少;2.nTreg/mTreg的比率,RTE-Treg占總Treg細(xì)胞比例和
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