番茄miR172的抗病功能研究.pdf

1、MicroRNA(miRNA)作為一類生物體內(nèi)普遍存在的長(zhǎng)度為21-25個(gè)核苷酸的內(nèi)源性非編碼小分子RNA，在植物抵抗病原物過程中起著至關(guān)重要的調(diào)控作用。miR172作為植物體內(nèi)一類保守的miRNA，其所發(fā)揮的抗病功能已在多個(gè)物種中被相繼報(bào)道，而在番茄中卻相對(duì)較少，更多研究亟待深入。據(jù)此，本研究利用分子生物學(xué)的技術(shù)手段，將番茄miR172家族的兩個(gè)成員即miR172a和miR172b的前體基因序列分別在番茄中過量表達(dá)，探究了miR172

2、在番茄抗病過程中的功能。
　　首先，本研究利用生物信息學(xué)的方法分析了番茄miR172a和miR172b的序列特性，并對(duì)二者共同的靶基因進(jìn)行預(yù)測(cè)。結(jié)果表明:miR172a和miR172b的前體序列不同而成熟體序列相同，共同靶向APETALA2(AP2)乙烯響應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子，且miR172和miR172b的基因上游啟動(dòng)子區(qū)均含有與生物脅迫相關(guān)的順式作用元件。
　　其次，本研究利用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)分析了病原菌和激素處理下，番茄miR

3、172a和miR172b的成熟體、前體及靶基因的表達(dá)特性。結(jié)果表明Pre-MIR172a和Pre-MIR172b均能對(duì)上述脅迫條件作出響應(yīng)，且它們的成熟體即miR172與靶基因的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。
　　為了進(jìn)一步研究miR172的抗病功能，本研究將miR172a和miR172b的前體基因序列分別導(dǎo)入番茄中，并對(duì)轉(zhuǎn)基因番茄的抗病性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明:過表達(dá)MIR172a和MIR172b可有效提高番茄對(duì)病原菌的抗性。
　　本研究