番茄miR172的表達(dá)模式分析與功能驗(yàn)證.pdf

1、在植物的生長發(fā)育過程中，miRNAs對器官的發(fā)育和分類起到了重要的作用。它可以通過翻譯抑制或者降解mRNA來調(diào)控靶向基因的表達(dá)。在植物眾多的miRNA家族中，miR172是其中非常保守的一類家族，該家族成員通過翻譯抑制或降解mRNA，或者二者兼而有之的方式來進(jìn)行調(diào)節(jié)。之前有報(bào)道表明，miR172的靶向基因是AP2類乙烯響應(yīng)因子。
　　本研究中，我們在Micro-Tom（Solanum lycopersicum L.cv.）野生型番

2、茄里超表達(dá)和抑制表達(dá)miR172家族的兩個(gè)前體：pre-miR172b和pre-miR172Hom，之后通過定量PCR分析野生型和轉(zhuǎn)基因番茄中的miRNAs表達(dá)模式，從而確定miR172的功能。此外，我們還預(yù)測了8個(gè)miR172的AP2類靶向基因，同時(shí)分析了這8個(gè)基因在野生型和轉(zhuǎn)基因番茄中的表達(dá)水平。
　　定量PCR結(jié)果顯示，在野生型番茄的營養(yǎng)期內(nèi)，miR172表達(dá)水平在莖中最高；進(jìn)入生殖期后，其表達(dá)量在破色期呈最低狀態(tài)，之后逐漸

3、恢復(fù)，紅果期又達(dá)到了最高水平。這也解釋了番茄中超表達(dá)miR172b和miR172Hom后，植物會出現(xiàn)了葉片和莖變寬增厚的原因。隨著番茄在生殖期時(shí)的靶標(biāo)基因SlAP2a,SlAP2h,SlAP2b和SlAP2c表達(dá)水平的提高，超表達(dá)miR172b和miR172Hom會使果實(shí)呈現(xiàn)出膨大及方向型缺損的表型。此外，根據(jù)本研究發(fā)現(xiàn)，野生型番茄的果實(shí)從營養(yǎng)期到成熟期的過渡階段要早于超表達(dá)轉(zhuǎn)基因番茄。
　　表型分析及表達(dá)水平分析顯示，植物中mi