柿葉提取物抗大鼠心肌缺血再灌注損傷的實驗研究.pdf

1、目的：研究柿葉水提物及其總黃酮對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用并對其機制進行初步探討。 方法：選取心電圖正常SD大鼠，隨機分為9組，每組10只，雌雄各半：假手術(shù)(Sham)組、心肌缺血再灌注損傷(MIR)組、柿葉水提物低劑量(WPLL)組、柿葉水提物中劑量(WPLM)組、柿葉水提物高劑量(WPLH)組、柿葉總黃酮低劑量(PLFL)組、柿葉總黃酮中劑量(PLFM)組、柿葉總黃酮高劑量(PLFH)組和維拉帕米(Ver)組。缺血前3

2、0min經(jīng)十二指腸注射給藥。采用在體大鼠結(jié)扎冠狀動脈左前降支30min后，再灌注60min，建立心肌缺血再灌注損傷模型。再灌注60min后，測定下列各項指標：1.利用MS4000生物信號定量記錄分析系統(tǒng)觀察并紀錄在急性缺血和再灌注狀態(tài)下血流動力學(xué)指標(HR、LVSP、LVDP、LVDEP和+dp/dtmax)的變化。2.從腹主動脈采血3ml，離心，取上層血清，按試劑盒說明測定AST、CK、CK-MB、LDH、LDH1，SOD、GSH-P

3、x的活性、MDA含量；取缺血區(qū)心肌組織，按試劑盒說明書測定組織中ATP酶活性。3.從腹主動脈采血3ml，離心，取上層血清，按試劑盒說明，測定一氧化氮合酶(NOS)活性，TTC法測量心肌梗死面積。4.各鼠取缺血區(qū)的心肌組織，常規(guī)制作組織切片，光鏡下觀察心肌組織病理結(jié)構(gòu)變化并拍照；免疫組化法測定Bcl-2和Bax蛋白表達。 結(jié)果： ⑴與MIR組比較，再灌注30min(r30min)時，WPLM、WPLH、PLFM、PLFH、Ver組

4、的HR高于MIR組(P<0.05)，而LVDP低于MIR組(P<0.05)；再灌注60min(r60min)時，WPLM、WPLH、PLFM、 PLFH、Ver組HR、LVSP、+dp/dtmax高于MIR組(P<0.05)，而LVDP、LVDEP、-dp/dtmax低于MIR組(P<0.05)。⑵與MIR組比較，柿葉提取物能顯著降低血清中各項心肌酶活性和MDA的含量，提高SOD、GSH-Px的活性，同時提高組織中ATP酶的活性(P<0

5、.01或P<0.05)。⑶與MIR組比較，WPLM、WPLH、PLFH心肌梗死面積明顯低于MIR組(P<0.01或P<0.05)；WPLM、WPLH、PLFM、PLFH組血清NO含量明顯高于MIR組(P<0.01或P<0.05)，tNOS和cNOS活性明顯高于MIR組(P<0.01或P<0.05)，而iNOS活性明顯低于MIR組(P<0.01或P<0.05)。⑷組織病理學(xué)觀察，發(fā)現(xiàn)柿葉提取物各組都能在一定程度上減輕缺血再灌注心肌細胞的損