柿葉提取物抗大鼠心肌缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究柿葉水提物及其總黃酮對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行初步探討。 方法：選取心電圖正常SD大鼠，隨機(jī)分為9組，每組10只，雌雄各半：假手術(shù)(Sham)組、心肌缺血再灌注損傷(MIR)組、柿葉水提物低劑量(WPLL)組、柿葉水提物中劑量(WPLM)組、柿葉水提物高劑量(WPLH)組、柿葉總黃酮低劑量(PLFL)組、柿葉總黃酮中劑量(PLFM)組、柿葉總黃酮高劑量(PLFH)組和維拉帕米(Ver)組。缺血前3

2、0min經(jīng)十二指腸注射給藥。采用在體大鼠結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支30min后，再灌注60min，建立心肌缺血再灌注損傷模型。再灌注60min后，測(cè)定下列各項(xiàng)指標(biāo)：1.利用MS4000生物信號(hào)定量記錄分析系統(tǒng)觀察并紀(jì)錄在急性缺血和再灌注狀態(tài)下血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)(HR、LVSP、LVDP、LVDEP和+dp/dtmax)的變化。2.從腹主動(dòng)脈采血3ml，離心，取上層血清，按試劑盒說(shuō)明測(cè)定AST、CK、CK-MB、LDH、LDH1，SOD、GSH-P

3、x的活性、MDA含量；取缺血區(qū)心肌組織，按試劑盒說(shuō)明書測(cè)定組織中ATP酶活性。3.從腹主動(dòng)脈采血3ml，離心，取上層血清，按試劑盒說(shuō)明，測(cè)定一氧化氮合酶(NOS)活性，TTC法測(cè)量心肌梗死面積。4.各鼠取缺血區(qū)的心肌組織，常規(guī)制作組織切片，光鏡下觀察心肌組織病理結(jié)構(gòu)變化并拍照；免疫組化法測(cè)定Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)。 結(jié)果： ⑴與MIR組比較，再灌注30min(r30min)時(shí)，WPLM、WPLH、PLFM、PLFH、Ver組

4、的HR高于MIR組(P<0.05)，而LVDP低于MIR組(P<0.05)；再灌注60min(r60min)時(shí)，WPLM、WPLH、PLFM、 PLFH、Ver組HR、LVSP、+dp/dtmax高于MIR組(P<0.05)，而LVDP、LVDEP、-dp/dtmax低于MIR組(P<0.05)。⑵與MIR組比較，柿葉提取物能顯著降低血清中各項(xiàng)心肌酶活性和MDA的含量，提高SOD、GSH-Px的活性，同時(shí)提高組織中ATP酶的活性(P<0

5、.01或P<0.05)。⑶與MIR組比較，WPLM、WPLH、PLFH心肌梗死面積明顯低于MIR組(P<0.01或P<0.05)；WPLM、WPLH、PLFM、PLFH組血清NO含量明顯高于MIR組(P<0.01或P<0.05)，tNOS和cNOS活性明顯高于MIR組(P<0.01或P<0.05)，而iNOS活性明顯低于MIR組(P<0.01或P<0.05)。⑷組織病理學(xué)觀察，發(fā)現(xiàn)柿葉提取物各組都能在一定程度上減輕缺血再灌注心肌細(xì)胞的損