維藥高孜萬提取物對心肌缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、目的：研究高孜萬提取物對心肌缺血再灌注損傷的保護作用，為闡述該藥材抗心肌缺血活性的物質基礎及其進一步的開發(fā)利用提供試驗依據(jù)。
　　方法：1)建立缺氧/復氧體外小鼠原代心肌細胞模型以模擬缺血再灌注損傷。實驗分為二十四組，正常對照組，缺氧/復氧組，陽性對照組（缺氧/復氧+1.25mg/mL葛根素），高、中、低劑量乙醇提取物處理組（缺氧/復氧+高、中、低濃度高孜萬乙醇提取物），高、中、低劑量石油醚萃取物處理組（缺氧/復氧+高、中、低濃度

2、高孜萬石油醚萃取物），高、中、低劑量乙酸乙酯萃取物處理組（缺氧/復氧+高、中、低濃度高孜萬乙酸乙酯萃取物），高、中、低劑量正丁醇萃取物處理組（缺氧/復氧+高、中、低濃度高孜萬正丁醇萃取物），高、中、低劑量水萃取物處理組（缺氧/復氧+高、中、低濃度高孜萬水萃取物），高、中、低劑量總黃酮有效部位處理組（缺氧/復氧+高、中、低濃度高孜萬總黃酮有效部位），高、中、低劑量蘆丁處理組（缺氧/復氧+高、中、低濃度高孜萬蘆?。?。采用MTT法檢測原代心肌

3、細胞存活率，采用酶標法檢測細胞培養(yǎng)上清液中乳酸脫氫酶(LDH)水平、細胞內的丙二醛(MDA)含量和細胞內超氧化物歧化酶（SOD）的活力。2)建立C57BL/6小鼠缺血再灌注模型，取C57BL/6小鼠分為假手術組、心肌缺血再灌注組、高孜萬總黃酮有效部位高中低劑量組，采用抗原-抗體Elisa法測定血清心肌酶CK-MB、心標志物CTn-I活性，采用伊文思藍-氯化三苯四氮唑染色法測定心肌梗死率，并對缺血梗死區(qū)進行病理HE染色。
　　結果：

4、1)與正常對照組比較，缺氧/復氧組呈現(xiàn)時間依賴性地降低原代心肌細胞存活率；與缺氧/復氧組比較，乙醇提取物處理組、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水萃取物、總黃酮有效部位、陽性對照及蘆丁組顯著提高細胞存活率(P＜0.01或P＜0.05)，降低LDH、MDA含量(P＜0.01或P＜0.05)，SOD活力顯著性提高，差異有統(tǒng)計學意義。綜合作用時間和作用濃度，乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物作用較強（P<0.01）。2)各組心肌梗死百分率比較：與假手

5、術組比較，模型組心肌梗死百分率顯著提高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；與模型組比較，高孜萬總黃酮有效部位組心肌梗死百分率顯著下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。各組中CK-MB和CTnⅠ水平比較：與假手術組比較，模型組CK-MB和CTnⅠ水平顯著性增加，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。與模型組比較，高孜萬總黃酮有效部位組CK-MB和CTnⅠ水平顯著降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　結論：1)高孜萬乙醇提取物、