姜黃素衍生物C086對腫瘤肝原位移植模型的抗腫瘤作用及其機理的研究.pdf

1、目的：建立肝癌皮下與肝原位移植瘤小鼠模型，研究姜黃素衍生物體內外抗腫瘤作用及其機理，探討其與索拉菲尼聯(lián)合抗肝癌的作用。
　　方法：⑴四甲基偶氮唑藍（MTT）法檢測姜黃素衍生物 C086及索拉菲尼對 HepG-2細胞的增殖抑制作用，以及二者聯(lián)合抑制作用。⑵以KM小鼠H22肝癌細胞皮下移植瘤和肝癌原位移植瘤為模型，評價姜黃素衍生物體內抗腫瘤生長活性。⑶以裸鼠人肝癌HepG-2細胞皮下移植瘤和肝癌原位移植瘤為模型，評價姜黃素衍生物體內抗

2、腫瘤生長活性。⑷Western-blot方法檢測C086對HepG-2細胞RAS-RAF-MAPK增殖信號通路和Caspase家族凋亡信號通路的影響。⑸免疫組化及western-blot方法檢測C086對HepG-2裸鼠肝臟原位移植瘤中RAF-1、MEK、p-MEK、ERK、p-ERK表達量的影響。
　　結果：①C086及索拉菲尼均呈濃度依賴性的抑制HepG-2細胞生長，C086作用細胞48小時IC50值為5.71±0.51μg·

3、mL-1，索拉菲尼為11.06±1.66μg·mL-1。二者聯(lián)用CI值小于1，有協(xié)同作用。②C086100mg/kg、150mg/kg每日一次尾靜脈給藥，200mg/kg每日一次灌胃給藥，對小鼠H22皮下瘤抑制率分別為36.2％、43.1%、61.4%，CTX組抑瘤率為79.7%。除CTX組體重下降外其余各組體重無明顯下降。C086200mg/kg每日一次灌胃給藥對小鼠H22肝原位移植瘤抑制率為78.4%，索拉菲尼單用抑瘤率為68.0%

4、，C086與索拉菲尼聯(lián)用抑制率無明顯提高。③C08650mg/kg、100mg/kg、200mg/kg每日一次灌胃給藥對裸鼠人肝癌HepG-2皮下移植瘤抑制率分別為23.9%、27.1%、33.9%，索拉菲尼50mg/kg灌胃給藥抑制率為74.1%。C086100mg/kg與索拉菲尼聯(lián)用抑瘤率達到84.3%。C08650mg/kg、100mg/kg、200mg/kg每日一次灌胃給藥對裸鼠人肝癌HepG-2肝原位移植瘤抑制率分別為33.0

5、%、49.7%、69.1%，索拉菲尼50mg/kg灌胃給藥抑制率為66.8%，C086100mg/kg與索拉菲尼聯(lián)用抑瘤率達到84.6%。各組實驗結束前均無死亡，體重無明顯下降，各組差異小。④Western-blot結果顯示藥物處理的HepG-2細胞中p-ERK、p-MEK蛋白含量均減少并呈現(xiàn)一定的量效關系。⑤免疫組化及 western-blot結果顯示在裸鼠人肝癌 HepG-2原位移植瘤中RAF-1、p-MEK、 p-ERK表達水平呈

6、劑量依賴性降低，聯(lián)合給藥組降低更明顯。
　　結論：⑴姜黃素衍生物 C086固體分散體灌胃給藥能夠較強的抑制小鼠 H22肝腹水瘤、人肝癌HepG-2移植瘤體內生長。⑵姜黃素衍生物C086固體分散體在體內外均能夠抑制肝癌 HepG-2增殖，該抑制作用可能與藥物阻斷RAS-RAF-MAPK增殖信號通路，激活caspase家族凋亡途徑誘導細胞凋亡作用有關。⑶姜黃素衍生物C086聯(lián)合sorafenib對肝癌HepG-2有協(xié)同作用，該協(xié)同作用