uNK細(xì)胞在人類早孕蛻膜血管生成中的作用.pdf

1、目的：通過研究子宮自然殺傷細(xì)胞(uNK)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、促血管生成素2(Ang2)在人類早孕子宮蛻膜中的表達(dá)及相關(guān)性分析，明確uNK細(xì)胞在人類早孕蛻膜血管生成中的作用機(jī)制。 方法：收集2005年9月-2005年10月在四川大學(xué)華西附二院婦產(chǎn)科擬行人工流產(chǎn)終止妊娠、年齡在19-39歲的45例早孕婦女的蛻膜組織，采用免疫組化的方法檢測CD56、vEGF、FLKl、Ang2、Tie2和CD31在子宮蛻膜中的表達(dá)。同時(shí)采

2、用CD56單克隆抗體快速染色子宮蛻膜冰凍組織切片，通過激光顯微切割獲得單個(gè)uNK細(xì)胞，進(jìn)行巢式PCR的方法檢測VEGF mRNA和Ang2 mRNA在單個(gè)uNK細(xì)胞中的表達(dá)。采用秩相關(guān)統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行相關(guān)性分析。 結(jié)果：1、uNK細(xì)胞(CD56<'+>)大量存在于子宮蛻膜間質(zhì)中，主要集中在血管和腺體周圍的間質(zhì)中，uNK細(xì)胞的胞膜或胞漿呈現(xiàn)陽性。uNK細(xì)胞在子宮蛻膜問質(zhì)中的陽性率為23％(9％-46％)。 2、蛻膜組織中血管豐

3、富，CD31特異性的表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞中，平均微血管密度(MVD)為5.5士2.3，與間質(zhì)中uNK細(xì)胞的陽性表達(dá)率呈正相關(guān)(r=0.648,p<0.01)。 3、VEGF蛋白在子宮蛻膜腺上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞以及間質(zhì)細(xì)胞中皆有表達(dá)，蛻膜間質(zhì)中VEGF表達(dá)陽性率為14％(3％-29％)。uNK細(xì)胞的陽性率與VEGF表達(dá)陽性率呈正相關(guān)(r=0.53，P<0.01)。 4、Ang2蛋白在子宮蛻膜腺上皮細(xì)胞、蛻膜間質(zhì)細(xì)胞中都有表

4、達(dá)，蛻膜問質(zhì)中Ang2表達(dá)陽性率為15％(5％-33％)。uNK細(xì)胞陽性率與Ang2表達(dá)陽性率無相關(guān)性(r=0.24，P>0.05)。 5、蛻膜間質(zhì)中VEGF的陽性表達(dá)率與MVD呈正相關(guān)(r=0.891，p<0.01)，而間質(zhì)中Ang2陽性表達(dá)率與MVD無相關(guān)性(r=0.217，P>0.05)。 6、單uNK細(xì)胞巢式PCR顯示：VEGF和Ang2內(nèi)側(cè)引物擴(kuò)增后Ct值分別為35、25，VEGF在單個(gè)uNK細(xì)胞中的基因拷貝數(shù)

5、約為4×10<'2>，Ang2在單個(gè)uNK細(xì)胞中的基因拷貝數(shù)約為2×10<'5>。 結(jié)論：本研究發(fā)現(xiàn)人類早孕子宮蛻膜中uNK細(xì)胞與微血管密度、vEGF表達(dá)程度呈正相關(guān)，說明uNK細(xì)胞在早孕蛻膜血管生成中起到重要作用。通過單uNK細(xì)胞的巢式PCR研究，本研究首次發(fā)現(xiàn)人類早孕蛻膜uNK細(xì)胞可以表達(dá)VEGF mRNA和Ang2 mRNA，由此推測在人類早孕蛻膜組織中，uNK細(xì)胞可能通過自身表達(dá)的VEGF和Ang2來發(fā)揮促進(jìn)蛻膜血管生成