2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:研究貞清方對(duì)高糖環(huán)境培養(yǎng)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量、細(xì)胞增殖、細(xì)胞外基質(zhì)、SREBP-1及其靶基因ACC、FAS的影響。
   方法:選用大鼠腎小球系膜細(xì)胞系(HBZY-1),常規(guī)培養(yǎng)于37℃、5%CO2含10%滅活胎牛血清的低糖DMEM培養(yǎng)液中,細(xì)胞融合90%時(shí)進(jìn)行傳代,每2~3天傳代一次,將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的系膜細(xì)胞(2-4代)接種于培養(yǎng)板中,用不含血清的培養(yǎng)基同步化24h后,分組處理如下:正常對(duì)照組(5.5mM

2、葡萄糖)、高糖組(25mM葡萄糖)、二甲雙胍組(25mM葡萄糖+4mM二甲雙胍)、貞清方組(25mM葡萄糖+50μg/ml貞清方)培養(yǎng)48h后:
   1.MTT法和流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定系膜細(xì)胞增殖;
   2.酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量;
   3.酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法和免疫細(xì)胞化學(xué)法分別檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TGF-β1和FN含量和各組細(xì)胞中TGF-β1和FN的蛋白表達(dá)量;

3、r>   4.RT-PCR檢測(cè)各組細(xì)胞SREBP-1、ACC、FAS的mRNA含量;
   5.Western Blot檢測(cè)各組細(xì)胞SREBP-1、ACC、FAS的蛋白表達(dá)。
   結(jié)果:
   1.各組細(xì)胞增殖的結(jié)果:各組細(xì)胞處理48h后,與正常對(duì)照組相比,高糖組、二甲雙胍組、貞清方組均能刺激細(xì)胞增殖(P<0.01或P<0.05);與高糖組比較,二甲雙胍組、貞清方組均能抑制細(xì)胞增殖(P<0.01),且貞清方組

4、與二甲雙胍組對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用有明顯差異(P<0.01)。
   2.各組細(xì)胞內(nèi)甘油三酯TG 含量的變化:與正常組細(xì)胞相比,高糖組、二甲雙胍組、貞清方組細(xì)胞TG 含量均顯著增加(P<0.01);與高糖組比較,二甲雙胍組細(xì)胞TG 含量明顯降低(P<0.05),貞清方組細(xì)胞TG 含量顯著降低(P<0.01)。
   3.各組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TGF-β1和FN 含量和各組細(xì)胞中TGF-β1和FN的蛋白表達(dá)量:(1)TGF-β

5、1 含量的變化:與正常組比較,高糖組、二甲雙胍組、貞清方組TGF-β1 含量均明顯增加(P<0.01);與高糖組比較,二甲雙胍組TGF-β1 含量明顯降低(P<0.01),貞清方組TGF-β1 含量顯著降低(P<0.05)。(2)各組細(xì)胞FN含量的變化:與正常組比較,高糖組FN 含量明顯增加(P<0.01),二甲雙胍組、貞清方組FN 含量均顯著增加(P<0.05);與高糖組比較,二甲雙胍組和貞清方組FN含量均明顯降低(P<0.01)。<

6、br>   4.各組細(xì)胞SREBP-1、ACC、FAS的mRNA表達(dá)的比較:各組細(xì)胞處理48h后,與正常對(duì)照組相比,SREBP-1、ACC的mRNA表達(dá)在高糖組、二甲雙胍組、貞清方組細(xì)胞均明顯升高(P<0.01),而FAS基因的mRNA表達(dá)只在高糖組明顯升高(P<0.01);與高糖組比較,SREBP-1、FAS的mRNA表達(dá)在二甲雙胍組、貞清方組細(xì)胞均明顯降低(P<0.01),而ACC的mRNA表達(dá)僅在二甲雙胍組明顯降低(P<

7、   0.01)。
   5.各組細(xì)胞SREBP-1、ACC、FAS 蛋白表達(dá)的比較:各組細(xì)胞處理48h后,與正常對(duì)照組相比,高糖組、二甲雙胍組、貞清方組細(xì)胞SREBP-1、ACC、FAS 蛋白的表達(dá)均明顯升高(P<0.01 or P<0.05);與高糖組比較,二甲雙胍組、貞清方組細(xì)胞SREBP-1、ACC、FAS 蛋白的表達(dá)均明顯降低(P<0.01)。
   結(jié)論:貞清方能顯著抑制高糖環(huán)境培養(yǎng)下的大鼠腎小球系膜細(xì)胞內(nèi)

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