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文檔簡介
1、目的:
1、分析基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)在小鼠結核性腦膜炎病理過程中的表達特點及意義。
2、探討單核細胞-星形膠質細胞網絡對MMP-9表達的作用。
方法:
1、從32只 C57BL/6小鼠中隨機抽取16只,向側腦室注射10ul含(1.271±0.111)E+6 cfu的H37RV菌懸液作為實驗組,另16只用同樣方法注射10ul生理鹽水作為對照組,30天后處死所有小鼠。
2、分別從
2、兩組中隨機抽取4只小鼠,取一側腦組織進行結核菌培養(yǎng),另一側進行病理HE染色和免疫熒光共聚焦染色。
3、分別從兩組中隨機抽取4只小鼠,進行腦組織明膠酶譜檢測。
4、分別從兩組中隨機抽取4只小鼠,進行血腦屏障通透性檢測。
5、分別從兩組中隨機抽取4只小鼠,進行腦組織含水量檢測。
6、采用兩樣本t檢驗比較兩組差異,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
結果:
1、實驗組小鼠腦組織勻漿液
3、培養(yǎng)出結核菌落(4.900±1.407)E+4 cfu/ml,病理HE染色表現(xiàn)出蛛網膜下腔、腦室擴張,及大量炎癥細胞浸潤等典型腦膜炎病變,對照組小鼠腦組織勻漿液均未培養(yǎng)出結核菌落,病理HE染色未見明顯異常。
2、結核性腦膜炎小鼠腦組織 MMP-9活性明顯增強,實驗組明膠酶譜法MMP-9條帶累積光密度值為47821.25±19931.84,對照組為10081.50±3544.23(t=3.728,P=0.010),差異有統(tǒng)計學意
4、義。
3、結核性腦膜炎小鼠血腦屏障通透性增加,實驗組腦組織伊文斯蘭含量為11.8239±3.5954 ug/g,對照組為4.6823±3.4009 ug/g(t=2.887,P=0.028),差異有統(tǒng)計學意義。
4、結核性腦膜炎小鼠腦組織含水量增加,實驗組小鼠腦組織含水量比重為0.8492±0.0348,對照組為0.7752±0.0368(t=2.925,P=0.026),差異有統(tǒng)計學意義。
5、免疫熒光染
5、色顯示實驗組小鼠腦組織中MMP-9、GFAP和OX-42表達量均明顯增多,且MMP-9與GFAP和OX-42均分別大量重合,表明結核性腦膜炎小鼠小膠質細胞、星形膠質細胞活化并分泌大量MMP-9。
結論:
1、MMP-9在結核性腦膜炎小鼠中活性明顯增強。
2、MMP-9通過分解細胞外基質破壞血腦屏障,促進白細胞、炎性介質進入腦組織參與結核性腦膜炎的病理過程。
3、小膠質細胞-星形膠質細胞網絡參與調控
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