不同來源竹節(jié)參化學(xué)成分及其DNA的RAPD分析.pdf

1、目的:對不同來源竹節(jié)參及其混用的近源種進(jìn)行樣本采集,研究其化學(xué)成分的組成,主要活性成分-總皂苷的含量,運(yùn)用HPLC—UV指紋圖譜明確各品種化學(xué)成分的異同,同時(shí)對其DNA進(jìn)行RAPD分子鑒定,從基源上鑒別不同近似種。找到區(qū)分不同源竹節(jié)參的特異性條帶。為中藥竹節(jié)參的優(yōu)選提供參考。
　　方法:(1)采集不同產(chǎn)地竹節(jié)參。(2)通過萃取,大孔吸附樹脂,正向硅膠,反向硅膠及制備高效液相等手段,實(shí)現(xiàn)對各種竹節(jié)參主要化學(xué)成分的分離鑒定。(3)運(yùn)用

2、香草醛-高氯酸顯色法測定竹節(jié)參各近似種的總皂苷含量。(4)采用流動相為乙腈-0.1％磷酸水溶液梯度洗脫,研究不同來源竹節(jié)參指紋圖譜的區(qū)別,作相似度分析,并通過對照品對其主要色譜峰進(jìn)行確認(rèn)。(5)運(yùn)用CTAB法提取各品種竹節(jié)參總DNA。(6)對總DNA進(jìn)行RAPD多態(tài)性分析,找出不同來源,不同品種竹節(jié)參的分子差異。
　　結(jié)果:(1)樣品采集顯示,不同產(chǎn)地存在竹節(jié)參、狹葉竹節(jié)參、羽葉竹節(jié)參以及過渡品種。(2)分離出人參皂苷Re、竹節(jié)參

3、皂苷Ⅴ、竹節(jié)參皂苷Ⅳ、竹節(jié)參皂苷Ⅳa,竹節(jié)參皂苷-2(PJS-2)這五個(gè)主要的化學(xué)成分。(3)通過香草醛-高氯酸顯色法測定出竹節(jié)參各近似種的皂苷含量,結(jié)果顯示,竹節(jié)參各近似種皂苷含量差異不大,均在178mg.g-1至230 mg.g-1之間。(4)建立不同竹節(jié)參近似種的高效液相指紋圖譜,標(biāo)定了其主要色譜峰,初步明確近似種間主要差異化學(xué)成分。(5)通過 RAPD分析,找到了不同源竹節(jié)參的特異性條帶。
　　結(jié)論:竹節(jié)參存在竹節(jié)參、狹葉