人精子蛋白ERp57的功能研究.pdf

1、男性不育是目前日趨嚴重的生殖問題，而且目前的一些輔助生殖技術(shù)存在著成功率低的問題，所以近年來，很多研究都著重于尋找受精相關(guān)的候選蛋白從而能預(yù)測這些輔助生殖技術(shù)的成功率。本實驗室為了識別這些候選蛋白，在前期工作中，通過二維電泳和質(zhì)譜的方法建立了人睪丸蛋白質(zhì)譜系。在這個譜系中共鑒定出979個點對應(yīng)于541種蛋白質(zhì)。ERp57就是其中的一個蛋白質(zhì)。ERp57屬于蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶家族，在體細胞中主要表達于細胞質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中，主要功能是對新合成的蛋

2、白進行重折疊。在小鼠精子中，已證實ERp57定位于精子赤道部，在精卵融合過程中起著重要的作用。 本研究著重探討ERp57在人精子中的定位與功能，從而預(yù)測其在臨床上的應(yīng)用。首先western blot證實ERp57在人睪丸和人精子中確有表達，免疫組化顯示ERp57定位于人睪丸的初級精母細胞以上的各級生精細胞胞質(zhì)以及間質(zhì)細胞中，但在Sertoli細胞中表達較弱。用二維電泳與質(zhì)譜的方法鑒定出在人精子獲能前后ERp57發(fā)生了修飾形式的變

3、化。而通過凝集素?zé)晒馊旧C實ERp57抗體對A23187誘導(dǎo)的精子頂體反應(yīng)無作用。在體外，用人精子穿去透明帶倉鼠卵實驗證實抗ERp57的抗體能抑制人精子穿倉鼠卵，并且這種抑制效果呈現(xiàn)抗體濃度的依賴性。通過對臨床收集的IVF患者的精子標本的分析，發(fā)現(xiàn)IVF成功(受精率>60％)患者精子中ERp57含量與正常人精子標本中的含量之間沒有統(tǒng)計學(xué)差異，而IVF失敗(受精率<60％)患者精子中ERp57量與前兩者比較都明顯降低并有統(tǒng)計學(xué)意義?？傊?，