重組人表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子凝膠聯(lián)合磺胺嘧啶銀霜對(duì)兔燙傷創(chuàng)面修復(fù)作用的研究.pdf

1、 目的：采用自身對(duì)照方法,觀察外用重組人表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(Recombinant human epidermal growth factor,rh-EGF)凝膠復(fù)合磺胺嘧啶銀霜(Sulfadiazine Silver Cream,SD-Ag)對(duì)兔深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面愈合的影響,探索rh-EGF凝膠復(fù)合SD-Ag聯(lián)合用藥在促進(jìn)創(chuàng)面愈合中的作用機(jī)制。方法：選取20只健康成年新西蘭大白兔,2%戊巴比妥鈉耳緣靜脈麻醉,8%硫化鈉背部脫毛,分別于兔脊

2、柱兩側(cè)由前至后制作三對(duì)共6個(gè)直徑3.0cm圓形深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面,各創(chuàng)面間距2cm；每只兔創(chuàng)面沿脊柱由前至后定為A、B、C三組,A組：SD-Ag組、B組：rh-EGF凝膠組、C組：聯(lián)合用藥組,創(chuàng)面分別涂抹2-3mm厚藥物,凡士林紗布覆蓋后無(wú)菌敷料包扎,每日更換一次；分別于燙傷后4d、7d、10d、14d各處死5只兔子,肉眼觀察創(chuàng)面愈合情況,用透明網(wǎng)格紙描出各組創(chuàng)面圖形并計(jì)算創(chuàng)面愈合率(wound healing rate ,WHR)；先取痂

3、下組織1g行痂下細(xì)菌定量,再于創(chuàng)面中央取材,分別行HE染色觀察、免疫組化染色檢測(cè)微血管密度(microvessel density,MVD)及表皮生長(zhǎng)因子受體(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)。結(jié)果：(1)WHR：各組創(chuàng)面隨時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸縮小,各時(shí)間點(diǎn)聯(lián)合用藥組創(chuàng)面愈合率均高于單純用藥組,但燙傷4d時(shí)差異性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),燙傷7d、10d、14d,C(聯(lián)合用藥)組創(chuàng)面愈合率分別為

4、：34.54±2.69,62.72±11.52,76.16±13.60,而單純用藥組分別為：A(SD-Ag)組10.96±2.25,23.37 ±4.16,55.95±9.55；B(rh-EGF凝膠)組20.89±3.33,51.88±14.53, 64.07±6.54,差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；(2)HE鏡下：燙傷后4d,各組殘留皮膚附件破壞明顯增多,皮下間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn)。各組炎癥反應(yīng)于4至7d達(dá)高峰,炎細(xì)胞主要位于表皮、真皮

5、淺層,部分彌漫皮膚全層甚至侵犯肌肉層,7d 后逐漸降低,A 組、C 組反應(yīng)早且降低快,10d時(shí)上皮細(xì)胞島狀增生,少許毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞出芽,C組比A組、B組明顯,14天創(chuàng)面基本上皮化,成纖維細(xì)胞數(shù)目減少,但毛細(xì)血管數(shù)目仍較多；(3)痂下細(xì)菌定量分析：燙傷后4至7d細(xì)菌數(shù)量開(kāi)始減少,14d時(shí)細(xì)菌大部分被機(jī)體自身清除,以105cfu/g為基線,各組經(jīng)卡方檢驗(yàn), A組、C組與B組差異性有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而A組、C組間差異性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意

6、義(P>0.05)(4)MVD值：CD34一抗體標(biāo)記顯示MVD,高倍鏡觀察隨機(jī)5個(gè)視野,以孤立的棕黃色血管內(nèi)皮細(xì)胞或細(xì)胞簇代表一條單獨(dú)的微血管為界定標(biāo)準(zhǔn),結(jié)果顯示：燙傷7d時(shí)各組表達(dá)快速升高, 14d達(dá)高峰,三組數(shù)據(jù)各時(shí)段比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),B組、C組顯著增加,其中C(聯(lián)合用藥)組呈高度表達(dá)；(5)EGFR 平均光密度( average optical density,AOD)：各組均滿足先增加后減少的規(guī)律,燙傷7d、

7、10d時(shí)B組、C組EGFR表達(dá)提前并明顯強(qiáng)于A組,B組、C兩組差異性不顯著(P>0.05),但與A組差異性顯著(P<0.05),14d時(shí)B組、C組EGFR表達(dá)弱于A組,這可能和愈后瘢痕形成有關(guān)。結(jié)論：(1) rh-EGF凝膠復(fù)合SD-Ag聯(lián)合應(yīng)用于創(chuàng)面,能很好的發(fā)揮抗菌和促進(jìn)細(xì)胞增殖的協(xié)同作用,比單獨(dú)用藥效果明顯。(2)rh-EGF 凝膠復(fù)合 SD-Ag 聯(lián)合應(yīng)用于創(chuàng)面,形成基質(zhì),為創(chuàng)面愈合提供所需濕潤(rùn)環(huán)境同時(shí)也能抑制炎癥侵潤(rùn),保護(hù)創(chuàng)面