早期外用重組人表皮生長(zhǎng)因子對(duì)糖尿病合并燒傷創(chuàng)面愈合影響機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的 :針對(duì)表皮生長(zhǎng)因子對(duì)創(chuàng)面修復(fù)的積極作用，EGFR可調(diào)節(jié)皮膚創(chuàng)面愈合的多個(gè)方面。 方法: 第一部分：選取Wistar大鼠120只，隨機(jī)分為A、B、C、D共4個(gè)組，前3組經(jīng)腹腔注射鏈脲佐菌素誘導(dǎo)糖尿病模型，檢測(cè)血糖，確立為糖尿病模型后8周，4組同時(shí)制作深Ⅱ度燙傷模型，通過(guò)病理和免疫組化驗(yàn)證胰島的破壞情況和胰島素分泌情況，進(jìn)一步確證模型。各組燙傷后給與不同處理，測(cè)定傷后不同時(shí)向點(diǎn)的創(chuàng)面愈合率；并于燙傷傷后不同時(shí)相點(diǎn)分別取創(chuàng)面全厚

2、皮膚組織，免疫組化和免疫印記兩種方法檢測(cè)EGFR的表達(dá)及定位情況； mRNA原位雜交的方法檢測(cè)EGFR mRNA的表達(dá)變化情況。第二部分：免疫組化方法檢測(cè)各時(shí)相點(diǎn)創(chuàng)面組織中EGF、bFGF， mRNA原位雜交的方法檢測(cè)EGF mRNA和FGF mRNA的表達(dá)情況；免疫組化的方法檢測(cè)各時(shí)相點(diǎn)創(chuàng)面皮膚組織中CD34的表達(dá)情況，TLINEL法檢測(cè)創(chuàng)面細(xì)胞凋亡率及其分布特點(diǎn)，并進(jìn)行EGFR與兩種生長(zhǎng)因子的相關(guān)性分析。 第二部分：免疫組

3、化方法檢測(cè)創(chuàng)面組織中EGF、bFGF的表達(dá)變化，均顯示出A組各生長(zhǎng)因子增長(zhǎng)較快水平較高，而B(niǎo)、C組則水平較低且不同程度的滯后；mRNA原位雜交的方法檢測(cè)EGF mRNA，bFGF mRNA的變化情況，同樣顯示出其動(dòng)態(tài)變化的改變，與其蛋白變化想?yún)f(xié)調(diào)；免疫組化方法檢測(cè)各組創(chuàng)面組織中CD34的表達(dá)情況，反映出創(chuàng)面微血管變化亦發(fā)生不同程度的增長(zhǎng)速度和水平；TUNEL方法原位檢測(cè)細(xì)胞凋亡變化，隨著創(chuàng)面的縮小，A組細(xì)胞凋亡率降低較為明顯，而B(niǎo)、C組

4、細(xì)胞凋亡率雖然亦有降低，但降幅明顯較小。 結(jié)論: 1、外用rhEGF同時(shí)控制血糖可以明顯加速糖尿病合并燒傷創(chuàng)面的愈合： 2、在控制血糖的基礎(chǔ)上，外源性EGF的持續(xù)刺激可以明顯增強(qiáng)其受體mRNA及蛋白的表達(dá)； 3、EGFR的改變可以影響內(nèi)源性生長(zhǎng)因子及其mRNA的表達(dá)，從而發(fā)揮生長(zhǎng)因子的協(xié)調(diào)作用而加速創(chuàng)面的愈合； 4、在控制血糖的情況下，外源性EGF的持續(xù)刺激可以明顯加速創(chuàng)面微血管的形成，加速創(chuàng)面肉