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文檔簡(jiǎn)介
1、第一部分糖尿病合并燙傷大鼠模型的建立
目的:建立Wistar大鼠糖尿病模型,在其體表制作出占其體表面積10%的深Ⅱ度燙傷。
方法:采用STZ腹腔注射的方法制作糖尿病大鼠模型,采用控制熱水溫度以及燙傷時(shí)間的辦法來(lái)制作其深Ⅱ度燙傷模型。
結(jié)果:制作的糖尿病大鼠模型血糖穩(wěn)定,濃度都大于16.7mmol/L,且出現(xiàn)糖尿病的癥候群,通過(guò)免疫組化及HE染色技術(shù)證明胰島細(xì)胞的分泌減少,部分細(xì)胞已經(jīng)被破壞。深Ⅱ
2、度燙傷模型制作可復(fù)制性強(qiáng),HE染色證明皮膚表層被破壞,真皮下組織完整,殘留腺體的上皮細(xì)胞,形成有上皮小島。
結(jié)論:與其他糖尿病模型制作方法比較,腹腔注射STZ具有重復(fù)性好,實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)單,操作方便,結(jié)果可靠,且操作過(guò)程易于量化和標(biāo)準(zhǔn)化,模型穩(wěn)定??刂茻崴疁囟群蜖C傷時(shí)間來(lái)制作深Ⅱ度燙傷有使用物品簡(jiǎn)單,過(guò)程易操作,重復(fù)性強(qiáng),模型穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)。
第二部分局部聯(lián)合應(yīng)用胰島素和rhEGF在創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程中對(duì)基質(zhì)及細(xì)胞因子的作
3、用
目的:探討胰島素和rhEGF聯(lián)合應(yīng)用在糖尿病合并燒傷創(chuàng)面愈合的過(guò)程中對(duì)于基質(zhì)和細(xì)胞因子的作用,以及這些作用與創(chuàng)面愈合的關(guān)系。
方法:①把制作好的糖尿病合并燙傷大鼠模型清創(chuàng)以后隨機(jī)分為四組,分別是:空白對(duì)照組(A組),創(chuàng)面使用生理鹽水;胰島素組(B組),創(chuàng)面應(yīng)用胰島素進(jìn)行局部浸潤(rùn)注射;外噴rhEGF組(C組),創(chuàng)面外噴適量rhEGF;胰島素和rhEGF聯(lián)合應(yīng)用組(D組):創(chuàng)面應(yīng)用與胰島素組等劑量的胰島素局部
4、浸潤(rùn)注射,并且外噴與rhEGF組同等劑量的rhEGF。用藥以后創(chuàng)面進(jìn)行包扎。②在創(chuàng)面愈合過(guò)程中不同時(shí)相點(diǎn)檢測(cè)OHP含量(樣本堿水解法)、TGFα含量(原位雜交)和VEGF含量(ELISA)。③在創(chuàng)面愈合過(guò)程中與上述相同的時(shí)相點(diǎn),檢測(cè)各組創(chuàng)面愈合率以及VEGF的分布(抗VEGF抗體的免疫組化)。
結(jié)果:①B組和C組不同時(shí)相點(diǎn)創(chuàng)面愈合率差異不大,D組創(chuàng)面愈合率在不同時(shí)相點(diǎn)都要高于其余三組。②B、C、D組OHP含量在不同時(shí)相點(diǎn)都
5、高于A組,且D組與B、C組在不同時(shí)相點(diǎn)都存在差異(P<0.05)。③TGFα含量在B、C、D組都有適當(dāng)?shù)奶岣?,?duì)照組明顯低表達(dá),D組在不同時(shí)相點(diǎn)的表達(dá)與B、C組有差異(P<0.01)。④VEGF主要分布在血管內(nèi)皮細(xì)胞及創(chuàng)面基底部,D組在高水平維持時(shí)間較長(zhǎng),與B、C組之間存在差異(P<0.05),B、C、D組的維持水平濃度、峰值出現(xiàn)時(shí)間均優(yōu)于A組,B、C組間差異不甚明顯。
結(jié)論:①在用胰島素控制局部血糖情況下,外用rhEGF
6、能明顯加速糖尿病燒傷創(chuàng)面愈合,這一方面可能是補(bǔ)充了創(chuàng)面本身刺激因子不足,另外一方面血糖的控制也能上調(diào)受體的表達(dá),促進(jìn)愈合。②徹底地清創(chuàng)和包扎對(duì)于rhEGF可以增加其接觸時(shí)間,局部浸潤(rùn)注射胰島素也減少其揮發(fā),持續(xù)作用,為rhEGF發(fā)揮作用提供良好的環(huán)境。③聯(lián)合使用rhEGF和胰島素在糖尿病創(chuàng)面愈合過(guò)程中,可以協(xié)調(diào)調(diào)控創(chuàng)面愈合中膠原的代謝。④局部血糖控制后,rhEGF刺激可以增加其它細(xì)胞因子的表達(dá),加速創(chuàng)面新生血管形成,再上皮化,早日封閉創(chuàng)
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