公共環(huán)境中葡萄球菌對季銨鹽類消毒劑的抗性研究.pdf

1、目的:檢測公共消毒環(huán)境分離的葡萄球菌對季銨鹽類化合物的抗藥性、相關抗性基因的定位和耐藥的轉移及其影響因素,為有效控制細菌對消毒劑耐藥性的發(fā)展提供一定科學研究基礎,為消毒劑的合理使用提供新的科學依據(jù)。
　　 方法:收集醫(yī)院公共消毒環(huán)境中分離的葡萄球菌共26株,采用瓊脂稀釋測定MIC的方法對其耐藥性和對消毒劑的適應性進行考察。應用PCR基因擴增試驗檢測葡萄球菌中耐季銨鹽的qacA/B,smr,qacG,qacH和qacE△1基因水平

2、。然后提取和消除耐藥菌株的質粒,確定基因是否位于質粒上。最后進行耐藥質粒在葡萄球菌和大腸埃希菌之間的接合轉移實驗,并考察不同供受體比例,交配時間下接合轉移率的不同,以及亞抑菌濃度季銨鹽作用和作用時間對接合轉移率的影響。
　　 結果:在調查的26株葡萄球菌中已經(jīng)有15株對季銨鹽產(chǎn)生了較高的抵抗力,最小抑菌濃度值高于48μg/ml。絕大多數(shù)葡萄球菌經(jīng)過適應性的培養(yǎng)后,最小抑菌濃度都有不同程度的增長。其中S1的MIC值更是從141μg

3、/ml上升到48μg/ml。但有10株增長后仍不超過26μg/ml。其余初始最小抑菌濃度值不低于48μg/ml的菌株除812培養(yǎng)后最小抑菌濃度仍為50μg/ml外,都高于70μg/ml。其中9株攜帶qacA/B基因,1株攜帶smr。qacG,qacH和qacE△1均未檢出。提取質粒后的結果中,我們發(fā)現(xiàn)提取到質粒的九株葡萄球菌剛好是被檢出含有qacA/B耐藥基因的菌株,含有qacA/B耐藥基因的菌株都攜帶有質粒。質粒消除后,葡萄球菌對季銨

4、鹽的耐藥性大幅下降。質粒可以在葡萄球菌和大腸埃希菌細菌之間進行轉移。質粒從葡萄球菌到大腸埃希菌的濾膜接合轉移中,最佳的供受體比例為3:1,最佳的交配時間為32h,添加亞抑菌濃度的季銨鹽可以大大提高轉移率,且最佳的濃度為4μg/ml,而接合轉移率隨著亞抑菌濃度季銨鹽作用時間的增加而增加。
　　 結論:醫(yī)院消毒環(huán)境中葡萄球菌對季銨鹽的耐藥率高,攜帶了qacA/B耐藥基因的菌株,均表現(xiàn)出對季銨鹽的抵抗性。qacA/B耐藥基因位于質粒上