嘧菌酯對辣椒炭疽菌（Colletotrichum capsici）的毒力及分子毒理學(xué)研究.pdf

1、嘧菌酯(Azoxystrobin)是由先正達(dá)公司(原捷利康)開發(fā)的，也是第一個(gè)商品化的甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，具有殺菌活性高，防病譜廣，與環(huán)境相容性好等突出優(yōu)點(diǎn)。甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑作用于真菌線粒體電子傳遞鏈的復(fù)合物Ⅲ，阻斷電子傳遞，干擾能量合成，因其通過與細(xì)胞色素b(cyt b)的Qo部位結(jié)合而稱之為Qo抑制劑(QoI)。由于其獨(dú)特的作用機(jī)制，與已有的所有殺菌劑無交互抗藥性。但已有研究表明多種植物病原真菌對該類藥劑產(chǎn)生抗藥性自發(fā)突變

2、頻率較高，在高選擇壓下自然界易形成抗藥性病原真菌群體。 辣椒炭疽病(Colletotrichum capsici，C.gloeosporioides)是中國辣椒生產(chǎn)上的嚴(yán)重病害。但長期以來一直缺乏防治辣椒炭疽病的有效藥劑，尋找新型高效殺菌劑來控制辣椒炭疽病的流行已成為化學(xué)防治工作者的目標(biāo)。所以研究辣椒炭疽病菌對嘧菌酯的敏感性及其在嘧菌酯處理下藥物靶標(biāo)在生化和基因水平上的毒理學(xué)具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。 離體培養(yǎng)條件下，嘧菌酯單

3、獨(dú)作用對辣椒炭疽菌的菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制作用弱。旁路氧化在辣椒炭疽菌野生菌株的孢子萌發(fā)中提供大于95倍生理功能的補(bǔ)償作用；在菌絲生長中提供20～35倍的補(bǔ)償作用。嘧菌酯抑制辣椒炭疽菌孢于產(chǎn)生和黑色素形成。 通過噴霧、涂抹、針刺3種方法接種感病甜椒幼苗和紅熟果實(shí)，結(jié)果表明，多針刺孔接種甜椒紅熟果實(shí)發(fā)病效果最好，故采用多針刺孔的方法接種甜椒紅熟果實(shí)以測定嘧菌酯防治辣椒炭疽病的保護(hù)和治療作用。嘧菌酯對防治辣椒炭疽病有較理想的保護(hù)和

4、治療作用。在藥劑處理后間隔1d接種，10μg/L嘧菌酯的防治效果即達(dá)到95.5％；接種病菌間隔1 d后藥劑處理，10μg/L嘧菌酯對其防效為85％。嘧菌酯還有良好的抗擴(kuò)展和抗產(chǎn)孢作用。用嘧菌酯處理過的病斑產(chǎn)生的分生孢子萌發(fā)活力和致病力下降。 在海南省五點(diǎn)采樣分離到的78株炭疽病菌中， 94.9％為膠胞炭疽菌，5.1％為辣椒炭疽菌。在室內(nèi)采用孢子萌發(fā)法測定了所有菌株對嘧菌酯的敏感性。結(jié)果嘧菌酯對辣椒炭疽菌(Colletotrich

5、um capsici)的毒力及分子毒理學(xué)研究未檢測到抗性菌株，并且辣椒炭疽病菌在數(shù)次施用嘧菌酯后敏感性雖略有下降，但差異不顯著。對嘧菌酯最耐藥和最敏感的DD1-61和T-53菌株的無性單孢后代對嘧菌酯的敏感性均出現(xiàn)分離，但這兩個(gè)后代群體對嘧菌酯的敏感性存在明顯的差異，這表明兩個(gè)親本菌株間確實(shí)有差異。 10μg/mL嘧菌酯處理1h對辣椒炭疽菌菌絲呼吸耗氧有良好的抑制作用。但隨處理時(shí)間延長，藥劑對菌絲耗氧的抑制作用減弱。研究證明延

6、長處理時(shí)間呼吸作用對藥劑的敏感性下降的機(jī)理不是旁路氧化途徑增強(qiáng)，也不是基質(zhì)中藥劑效力的下降或藥劑已被飽和。測定嘧菌酯處理0、1、12、48h細(xì)胞色素b基因的轉(zhuǎn)錄水平，結(jié)果表明，藥劑處理1h后，細(xì)胞色素b基因的轉(zhuǎn)錄水平迅速下降，但12h后增強(qiáng)，甚至在48h時(shí)mRNA的量高于對照，與呼吸作用測定結(jié)果相符，這表明藥劑處理后對菌絲呼吸作用的抑制的變化與mRNA的轉(zhuǎn)錄水平有關(guān)。測定嘧菌酯處理0、1、12、48h旁路氧化酶基因的mRNA轉(zhuǎn)錄水平，結(jié)

7、果表明，藥劑作用12h后旁路氧化酶基因轉(zhuǎn)錄水平顯著降低，但當(dāng)藥劑作用48h后，旁路氧化酶基因的轉(zhuǎn)錄水平得到恢復(fù)，甚至與對照的無明顯差別。 嘧菌酯對黃瓜灰霉病菌、水稻紋枯病菌、稻瘟病菌的菌絲生長，對黃瓜灰霉病菌和稻瘟病菌的孢子萌發(fā)、孢子產(chǎn)生，對水稻紋枯病菌的菌核生成有抑制作用，對稻瘟病菌的黑色素形成有延緩作用。SHAM對嘧菌酯的毒力有顯著的增效作用。菌絲耗氧率測定表明嘧菌酯對水稻紋枯病菌的呼吸始終有抑制作用，對稻瘟病菌和黃瓜灰霉病