釀酒酵母生物合成腺苷甲硫氨酸的研究.pdf

1、S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,簡(jiǎn)稱SAM,SAMe或者AdoMet),又名S-腺苷蛋氨酸,是一種廣泛存在于植物、動(dòng)物、微生物活細(xì)胞體內(nèi)的重要代謝物質(zhì),同時(shí)也是人體內(nèi)一種作用僅次于ATP的重要生理活性物質(zhì)。SAM在細(xì)胞內(nèi)主要起著轉(zhuǎn)甲基、轉(zhuǎn)硫和轉(zhuǎn)氨丙基的作用,在臨床上,對(duì)于治療肝病、抑郁癥、關(guān)節(jié)炎、肌纖維痛和阿爾茨海默等都具有一定的療效,目前廣泛的應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)和保健品行業(yè)。SAM的制備方法主要有化學(xué)合成

2、法、酶促合成法、發(fā)酵法三種,其中通過對(duì)酵母屬的微生物培養(yǎng)過程中向培養(yǎng)基中添加一定量的甲硫氨酸,提高細(xì)胞內(nèi)SAM的積累量再從中分離、提純SAM是目前工業(yè)生產(chǎn)的主要途徑。為了實(shí)現(xiàn)國(guó)內(nèi)SAM的工業(yè)化生產(chǎn),采用新的基因工程策略構(gòu)建高效、穩(wěn)定的產(chǎn)SAM菌株具有重要意義。
　　釀酒酵母是常見的真核生物,現(xiàn)已被美國(guó)食品與藥品安全管理局認(rèn)證為安全的微生物。現(xiàn)有研究表明,SAM在釀酒酵母中的積累程度要高于其他的微生物,研究重點(diǎn)主要為高產(chǎn)菌株的篩選、

3、發(fā)酵條件的優(yōu)化等,但在國(guó)內(nèi)一直未能實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
　　本論文對(duì)釀酒酵母生物合成腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)發(fā)酵過程進(jìn)行工藝優(yōu)化。首先測(cè)定了此釀酒酵母(S.cerevisiaeCGMCC2842)的生長(zhǎng)曲線,研究了半胱氨酸添加量(0、2、4、6、8mmol/L)、半胱氨酸添加時(shí)間(0、12、16、20、24h)、碳源(葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、糖蜜)對(duì)菌體濃度和SAM產(chǎn)量的影響。結(jié)果表明,在10L發(fā)