釀酒酵母全細胞催化腺苷磷酸化合成三磷酸腺苷的機理研究.pdf

1、利用啤酒酵母酶系催化腺苷磷酸化合成三磷酸腺苷，是最具應(yīng)用前景的三磷酸核苷生產(chǎn)方法之一。認識反應(yīng)機理，優(yōu)化生產(chǎn)工藝、提高產(chǎn)率、降低成本是當前三磷酸核苷工業(yè)化生產(chǎn)急待解決的問題。
　　 本文對釀酒酵母全細胞催化腺苷磷酸化合成三磷酸腺苷的機理進行了探討，主要從以下四個方面進行了研究：
　　 1、膜透性對ATP積累的影響。通過研究不同促滲透劑：新型促滲透劑I5、甲苯、氣流干燥及吐溫100，細胞活性(酒精生產(chǎn)能力)與細胞合成ATP

2、的關(guān)系，探討新型促滲透劑I5破壁效果以及對細胞酶系合成ATP活力的影響。
　　 2、線粒體對ATP積累的影響。對細胞膜及細胞酶系的深入研究，實驗室自身合成了新型促滲透劑I5，通過添加線粒體解偶聯(lián)劑二硝基苯酚與否，研究了線粒體對細胞酶系磷酸化合成ATP的貢獻。
　　 3、無機小分子對ATP積累的影響。通過研究幾種主要的金屬離子(如Mg2+，K+和Na+)對釀酒酵母合成ATP過程的影響，初步探討了釀酒酵母合成ATP的反應(yīng)機理

3、。
　　 4、對釀酒酵母磷酸化合成三磷酸腺苷的機理有初步認識的基礎(chǔ)上，對以下11個因素進行實驗設(shè)計：A腺苷，B葡萄糖，C酵母，D硫酸銨，E硫酸鎂，F(xiàn)氯化鈉，G磷酸二氫鉀，H新型促滲透劑I5，I2，4-二硝基苯酚，J pH，K溫度。
　　 最終轉(zhuǎn)化率為99.1％，ATP得率為38g/L，較報導的水平90％提高了近10％，得率提高近2倍。
　　 基于磷酸化機理研究成果，完成了釀酒酵母全細胞催化腺苷磷酸化合成三磷酸腺苷