Ezrin的磷酸化調(diào)控作用.pdf

1、細胞極性是指細胞形態(tài)、蛋白質(zhì)分布以及細胞功能的不對稱性。幾乎所有的真核細胞都具有極化現(xiàn)象。極化的上皮細胞都有明顯的質(zhì)膜功能域：頂膜與底膜，這是上皮細胞中蛋白質(zhì)與脂類極性運輸?shù)慕Y(jié)果。胃壁細胞是典型的極化上皮細胞，負責胃酸及內(nèi)因子(Intrinsic factor)的分泌。胃壁細胞的酸分泌不僅具有重要的生理學功能，同時亦為研究cAMP依賴性的胞吐(Exocytosis)提供了不可多得的模式系統(tǒng)。 胃酸分泌是一個精細調(diào)節(jié)的生理過程，受

2、內(nèi)分泌、旁分泌以及神經(jīng)刺激所調(diào)控。眾所周知，組胺刺激所引發(fā)的磷酸化事件將導致壁細胞內(nèi)質(zhì)子泵H<'+>，K<'+>-ATPase的轉(zhuǎn)位以及細胞骨架的重排，最終將質(zhì)子從壁細胞中排出。 Ezrin是ERM(Ezrin-Radixin-Moesin)這個細胞膜/骨架聯(lián)接蛋白家族的成員。ERM家族的成員調(diào)控地連接著膜蛋白與細胞骨架，并且參與細胞骨架組建和信號傳導通路。Ezrin位于泌酸細胞的頂膜，參與耦連cAMP蛋白激酶激活與壁細胞的酸分

3、泌。我們最近的研究鑒定出PKA介導的Ezrin第66位絲氨酸的磷酸化并且確定了該磷酸化位點在壁細胞活化中的功能。我們利用生物化學實驗發(fā)現(xiàn)了一個新的Ezrin結(jié)合蛋白質(zhì)WWOX，WWOX含有兩個WW結(jié)構(gòu)域，是一個潛在的腫瘤抑制基因。我們的生化研究發(fā)現(xiàn)Ezrin第66位絲氨酸的磷酸化狀態(tài)通過改變Ezrin的構(gòu)象調(diào)控著Ezrin-WWOX之問的相互作用。系統(tǒng)研究揭示Ezrin-WWOX之間的相互作用是通過Ezrin羧基端的PPVY序列與WWO

4、X的第一個WW結(jié)構(gòu)域相互結(jié)合來實現(xiàn)的。我們的定點突變實驗進一步證實Ezrin的Tyrosine 477為Ezrin-WWOX相互作用所必須。鑒于Tyrosine477是酪氨酸激酶Src的一個底物，我們的實驗進一步表明Src和PKA介導的磷酸化可以通過調(diào)控Ezrin與WWOX的相互作用來改變細胞的動力學特征。我相信：通過生物光子學、結(jié)構(gòu)生物學與細胞生物學的綜合與交叉，我們會在不久的將來在納米水平闡明Ezrin的分子動力學特征及其可塑性的物