柑桔種子中類(lèi)檸檬苦素提取純化工藝研究.pdf

1、類(lèi)檸檬苦素在柑桔屬中含量豐富，是柑桔主要的次生代謝產(chǎn)物之一，也是引起柑桔汁苦味的重要原因。柑桔類(lèi)檸檬苦素具有抗癌、殺蟲(chóng)、抗病毒、抑菌等生物學(xué)活性，有著廣泛的應(yīng)用前景。 本文以錦橙種子為原料，在研究建立紫外分光光度法快速測(cè)定類(lèi)檸檬苦素的方法基礎(chǔ)上，采用單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)曲面法優(yōu)化了超聲輔助法和水溶助劑法提取類(lèi)檸檬苦素的工藝條件，并初步開(kāi)展了大孔樹(shù)脂純化分離純化的研究。其主要研究結(jié)果如下： (1)以DMAB作為指示劑，進(jìn)行比色

2、分析，確定檸檬苦素標(biāo)準(zhǔn)品掃描最大波長(zhǎng)為470nm，建立吸光度與濃度的線性回歸方程為y=0.0028x+0.0047，R2=0.9945。其平均回收率在91.30％到94.48％之間。此法不需要昂貴的設(shè)備，操作簡(jiǎn)單，具有較高的靈敏度，可快速準(zhǔn)確的檢測(cè)出柑桔種子中類(lèi)檸檬苦素的總量。 (2)用不同的有機(jī)溶劑提取類(lèi)檸檬苦素，氯仿提取效果最好，其次為丙酮和乙腈，綜合考慮安全性以及回收利用、經(jīng)濟(jì)成本等問(wèn)題，本實(shí)驗(yàn)選擇丙酮作為超聲輔助的提取溶

3、劑。 (3)通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)得出的最佳提取工藝參數(shù)為：離心脫脂時(shí)間為10min，濃度為80％的丙酮溶液，料液比為1：40，提取時(shí)間為30min，提取次數(shù)為2次。 (4)利用響應(yīng)面分析法確定了主要影響因素：提取劑濃度、料液比、提取試劑三者之間的最佳比例關(guān)系，按三元二次正交組合設(shè)計(jì)原理進(jìn)行設(shè)計(jì)，得到了回歸方程為：Y=4.253534+0.285534*X1+0.085791*X2+0.114783*X3-0.234684*X1

4、*X1-0.136576*X2*X2-0.133032*X3*X1+0.081444*X3*X2-0.105576*X3*X3并根據(jù)響應(yīng)面值典型分析求得了試劑濃度、料液比、提取時(shí)間的最佳組合值分別為：85％、47：1、32min，其對(duì)應(yīng)的響應(yīng)值類(lèi)檸檬苦素得率為4.362mg/g，而根據(jù)此組合實(shí)際測(cè)得值為4.297mg/g，與預(yù)測(cè)量的RSD為1.06％。 (5)在相同條件下，分別用兩種水溶助劑Na-Sal和Na-CuS提取類(lèi)檸檬苦

5、素，Na-CuS提取效果較好，得率為4.023mg/g，故選用Na-CuS為提取劑，并通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)確定最佳的提取類(lèi)檸檬苦素的工藝參數(shù)。 (6)通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)得出用Na-CuS提取類(lèi)檸檬苦素的最佳工藝參數(shù)為：提取時(shí)間為6h，提取劑濃度為2mol/L，溫度為40℃，提取劑用量為20mL。 (7)通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)得出用Na-CuS提取類(lèi)檸檬苦素的最佳工藝參數(shù)為：提取時(shí)間為6h、提取劑濃度為2.5mol/L、溫度為40℃

6、、提取劑用量為25mL，影響因素大小為提取劑濃度>提取劑用量>溫度>提取時(shí)間。在此最佳工藝下提取得率為4.322mg/g。 (8)比較了AB-8、HZ-841、DM130、D3520、XAD-16五種大孔樹(shù)脂的飽和吸附量、吸附率和解吸率，選定XAD-16作為類(lèi)檸檬苦素的樹(shù)脂。它的吸附率為94.12％，吸附量是43.58mg/g，解吸率是85.36％。 (9)XAD-16大孔樹(shù)脂純化類(lèi)檸檬苦素的工藝路線中各因素為：上樣流速