凋亡抑制蛋白PED-PEa-15在賁門腺癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的:賁門癌是我國(guó)常見的消化道惡性腫瘤之一，具有發(fā)病率高、轉(zhuǎn)移迅速、死亡率高等特點(diǎn)。其五年生存率低，嚴(yán)重威脅我國(guó)人民健康。賁門腺癌是我國(guó)賁門癌的主要病理類型。盡管隨著醫(yī)療水平的不斷發(fā)展，包括手術(shù)、放療、化療及新興的生物治療等方法不斷完善，但賁門腺癌患者的預(yù)后仍不容樂觀。研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖和凋亡是一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，這個(gè)平衡紊亂，腫瘤疾病就有可能發(fā)生。抑制細(xì)胞凋亡的作用越強(qiáng)，腫瘤預(yù)后效果越差、轉(zhuǎn)移越快。
　　 1998年Condore

2、lli等人在研究胰島素抵抗相關(guān)基因的2型糖尿病時(shí)發(fā)現(xiàn)了凋亡抑制蛋白PED/PEA-15。其參與細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、凋亡、ERK的激活等多種細(xì)胞進(jìn)程。PED/PEA-15以分子構(gòu)相中的特殊結(jié)構(gòu)域DED與其他含有DED的蛋白（如:TNF-α、TRAIL以及Fas等）結(jié)合，抑制“死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合體(death-inducingsignalcomplex，DISC)”的形成進(jìn)而阻斷caspase的級(jí)聯(lián)激活。Caspase通過(guò)細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用，即線粒體

3、途徑:促進(jìn)凋亡的物質(zhì)，如Bid，與caspase8作用，可釋放一種物質(zhì)，即細(xì)胞色素C(cytochrome，cytC)，釋放的cytC與某些活化的因子相結(jié)Caspase9進(jìn)而使下游的Caspase3、Caspase6、Caspase7都相應(yīng)的激活，從而細(xì)胞凋亡也就發(fā)生。
　　 目前凋亡抑制蛋白PED/PEA-15在賁門腺癌中的表達(dá)及其作用尚未見相關(guān)報(bào)道。本研究通過(guò)免疫組化染色SP法和Westernblot法檢測(cè)人賁門腺癌組織、癌

4、旁組織及人賁門良性病變組織中凋亡抑制蛋白PED/PEA-15的表達(dá)，分析其與賁門腺癌臨床病理特征的關(guān)系及其術(shù)后遠(yuǎn)期生存率的關(guān)系，評(píng)價(jià)凋亡抑制蛋白對(duì)人賁門腺癌診斷及術(shù)后生存期的評(píng)價(jià)。
　　 方法:通過(guò)應(yīng)用免疫組化SP法分析人賁門腺癌腫瘤組織與病理證實(shí)為陰性的癌旁組織中凋亡抑制蛋白PED/PEA-15的陽(yáng)性表達(dá)水平，以同期賁門良性病變組織作為對(duì)照組。標(biāo)本取自河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院2005年1月-12月賁門腺癌患者標(biāo)本64例，術(shù)前均未行

5、放化療并且有較完整的隨訪記錄。其中男性35例，女性29例，年齡在45-75歲之間，平均年齡58.6歲。根據(jù)分化程度:低分化21例，高中分化43例;根據(jù)賁門腺癌腫瘤浸潤(rùn)深度:T117例T211例，T330例T46例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移39例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移25例。根據(jù)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個(gè)數(shù):0個(gè)25例，1個(gè)20例?！?個(gè)19例。根據(jù)胃癌TNM(2010年)分期標(biāo)準(zhǔn):Ⅰa-b17例，Ⅱa-b28例，Ⅲa-c19例;根據(jù)隨訪結(jié)果，可以按照生存期（＜20月、2

6、0月-40月、＞40月）作為研究階段。賁門良性病變患者標(biāo)本30例作為對(duì)照組。另外通過(guò)另一種方法，即Westernblot法標(biāo)本采集:標(biāo)本取自河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院2011年1月-6月賁門腺癌患者標(biāo)本34例，術(shù)前均未行放化療并且有較完整的隨訪記錄。其中男性26例，女性8例，年齡在50-75歲之間，平均年齡60.8歲。根據(jù)腫瘤浸潤(rùn)深度:表淺浸潤(rùn)組10例，深層浸潤(rùn)組24例。根據(jù)分化程度:低、中分化23例，高中分化11例;無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移11例，有淋

7、巴結(jié)轉(zhuǎn)移23例。
　　 結(jié)果:
　　 1.免疫組化檢測(cè)凋亡抑制蛋白PED/PEA-15在賁門腺癌組織、癌旁組織及正常組織中的表達(dá):凋亡抑制蛋白PED/PEA-15在賁門腺癌組織中的表達(dá)，其中陽(yáng)性（以+、++為陽(yáng)性）表達(dá)為75％(48/64)，陰性（以—為陰性）表達(dá)為25％(16/64);癌旁組織中的表達(dá)，其中陽(yáng)性表達(dá)為56.3％(36/64)，陰性表達(dá)為43.7％(28/64);賁門良性病變組織中的表達(dá)，其中陽(yáng)性表達(dá)為1

8、6.7％(5/30)，陰性表達(dá)為83.3％(25/30)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，三者表達(dá)有差異，且差異有顯著性(P＜0.05)。
　　 2.凋亡抑制蛋白PED/PEA-15在賁門腺癌組織中與各組生存期的表達(dá)關(guān)系:凋亡抑制蛋白PED/PEA-15在短期生存組多呈高表達(dá)，在長(zhǎng)期生存組多呈低表達(dá)，且凋亡抑制蛋白PED/PEA-15在各生存組中的表達(dá)有顯著性差異（P＜0.05）。
　　 3.免疫組化中凋亡抑制蛋白PED/PEA-15在

9、賁門腺癌組織中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系:賁門腺癌患者的年齡，性別與凋亡抑制蛋白PED/PEA-15表達(dá)無(wú)關(guān)(P＞0.05);賁門腺癌細(xì)胞分化程度、腫瘤浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)有無(wú)轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個(gè)數(shù)及TNM分期與凋亡抑制蛋白PED/PEA-15表達(dá)有密切關(guān)系(P＜0.05)。
　　 4.凋亡抑制蛋白PED/PEA-15表達(dá)與賁門腺癌術(shù)后累計(jì)生存率的關(guān)系:賁門腺癌患者的遠(yuǎn)期生存情況與凋亡抑制蛋白PED/PEA-15的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P＜0

10、.05)，凋亡抑制蛋白PED/PEA-15表達(dá)越高，遠(yuǎn)期生存情況就越差。
　　 5Westernblot檢測(cè)凋亡抑制蛋白PED/PEA-15在各組織的表達(dá)，在癌組織（2.189±0.367）中量顯著高于癌旁組織（1.321±0.249）和賁門良性病變粘膜(0.559-0.162)(P＜0.01)，癌旁組織顯著高于賁門良性病變粘膜(P＜0.01)。
　　 6Westernblot檢測(cè)中中低分化組(2.343±0.698)顯

11、著高于高分化組（1.782±0.186），且二者之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);深層浸潤(rùn)組（2.273±0.789）顯著高于淺層浸潤(rùn)組(1.565±0.343)二者之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、患者年齡及性別無(wú)關(guān)（P＞0.05）。
　　 結(jié)論:
　　 1.免疫組化檢測(cè)凋亡抑制蛋白PED/PEA-15在賁門腺癌及癌旁組織的表達(dá)水平顯著高于賁門良性病變組織，說(shuō)明凋亡抑制蛋白PED/PEA-15的表達(dá)水平

12、與賁門病變性質(zhì)有關(guān)。
　　 2.WesternBlot檢測(cè)凋亡抑制蛋白PED/PEA-15在賁門腺癌及癌旁組織的表達(dá)水平顯著高于賁門良性病變組織，說(shuō)明凋亡抑制蛋白PED/PEA-15的表達(dá)水平與賁門病變性質(zhì)有關(guān)。
　　 3.免疫組化檢測(cè)凋亡抑制蛋白PED/PEA-15的表達(dá)與賁門腺癌患者的年齡及性別無(wú)關(guān);與腫瘤的的分化程度、侵入深度及TNM分期均有密切關(guān)系。
　　 4.WesternBlot檢測(cè)凋亡抑制蛋白PED

13、/PEA-15的表達(dá)與賁門腺癌患者的年齡及性別無(wú)關(guān);與腫瘤的的分化程度、侵入深度有密切關(guān)系。
　　 5.凋亡抑制蛋白PED/PEA-15與賁門腺癌患者術(shù)后生存期呈負(fù)性相關(guān)。遠(yuǎn)期生存情況長(zhǎng)的賁門腺癌患者凋亡抑制蛋白PED/PEA-15表達(dá)較低，累計(jì)生存率高。遠(yuǎn)期生存情況短的賁門腺癌患者凋亡抑制蛋白PED/PEA-15表達(dá)較高，累計(jì)生存率低。凋亡抑制蛋白PED/PEA-15可作為判斷賁門腺癌預(yù)后的重要指標(biāo)。
　　 6.凋亡抑