Paenibacillus polymyxa JSa-9對鐮刀菌的抑制作用及生防技術(shù)研究.pdf

1、多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）是一種能夠產(chǎn)芽孢的革蘭氏陽性細(xì)菌，因其對人畜較安全，綠色、環(huán)保，且對植物無致病性，而被我國農(nóng)業(yè)部和美國環(huán)保署(EPA)列為免安全鑒定的商業(yè)化一級菌種。作為生防細(xì)菌，多粘類芽孢桿菌在防治植物枯萎病和降解農(nóng)藥等方面已有著廣泛的應(yīng)用，而在黃瓜枯萎病防治研究及其相關(guān)菌劑的制備方面則報道匱乏。
　　本研究以實(shí)驗(yàn)室篩選并保藏的Paenibacillus polymyxa JSa-9

2、菌株作為研究對象，首先通過測定JSa-9菌對真菌的抑制活性來確定其抑菌譜;其次，通過對JSa-9菌芽孢發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵條件優(yōu)化，篩選出最優(yōu)培養(yǎng)條件，為有效生防菌劑的制備提供理論方法;最后，通過JSa-9對黃瓜枯萎病的幼苗防治試驗(yàn)，為黃瓜枯萎病的生物防治提供理論依據(jù)。主要結(jié)論如下:
　　1.確定了多粘類芽孢桿菌Paenibacillus polymyxa JSa-9菌株的真菌抑菌譜。通過對峙培養(yǎng)法測定了JSa-9菌株對六株有害真菌的

3、拮抗活性，結(jié)果表明，JSa-9菌對尖鐮孢菌黃瓜專化型、禾谷鐮刀菌和串珠鐮孢菌均能產(chǎn)生明顯的拮抗帶，其最大抑菌帶分別為8.56mm、9.59mm、10.39 mm，同時發(fā)酵液對三株真菌的抑制率分別為43.20％、55.72％、43.76％。此外，通過生長速率法測定了JSa-9菌發(fā)酵液對三株真菌的抑制活性，結(jié)果表明，當(dāng)JSa-9菌發(fā)酵濃縮液添加量為16％時，其對尖鐮孢菌黃瓜專化型的抑制率達(dá)99.15％，對禾谷鐮刀菌和串珠鐮孢菌的抑制率菌均為

4、100％。
　　2.對多粘類芽孢桿菌Paenibacillus polymyxa JSa-9菌株產(chǎn)芽孢發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化。首先，通過單因素試驗(yàn)，確定產(chǎn)芽孢的最佳碳源、氮源和無機(jī)鹽分別為麥芽浸粉、玉米漿干粉和碳酸鈣。在單因素的基礎(chǔ)上，通過田口試驗(yàn)等進(jìn)一步優(yōu)化得到了最適產(chǎn)芽孢的培養(yǎng)基組成為:麥芽浸粉15g/L，玉米漿15g/L，CaCO35g/L，MgCl2.6H2O0.5g/L，MnSO4.H2O0.06g/L，吐溫801 mL/

5、L。在接種量為10％、初始pH7.0、培養(yǎng)溫度30℃、轉(zhuǎn)速180rpm條件下，芽孢產(chǎn)量和芽孢轉(zhuǎn)化率達(dá)分別為1.01×10TM cfu/mL和90.99％,芽孢產(chǎn)量比以BPY作為初始發(fā)酵培養(yǎng)基時提高了36.7倍。
　　3.對多粘類芽孢桿菌Paenibacillus polymyxa JSa-9菌株產(chǎn)芽孢的發(fā)酵條件的優(yōu)化。以優(yōu)化后的培養(yǎng)基作為發(fā)酵培養(yǎng)基，通過單因素試驗(yàn)確定:當(dāng)接種量為5％、初始pH為6.5、培養(yǎng)溫度為30℃時，JSa-