高產原果膠酶菌株的篩選鑒定及在桔皮果膠提取中的應用.pdf

1、桔皮-桔子深加工等的副產物，是工業(yè)生產果膠的主要原料之一，其中含有約30％(與桔皮干重之比)左右的果膠。 湖南作為全國柑桔主產省之一，全省柑桔年產量在150萬噸左右，20％左右深加工成桔子罐頭等產品，其余作為鮮果出售，大部分的桔皮沒有很好的利用甚至沒有得到利用，如果加以利用，變廢為寶，將是一項很有意義的工作。 本論文研究主要分為三部分：1)發(fā)酵菌株的篩選與鑒定；2)微生物發(fā)酵法生產果膠發(fā)酵條件的優(yōu)化；3)果膠的提取與精制

2、； 首先，從湖南常德市一傾倒腐爛柑桔的土坑中，取表層10cm以下土壤，篩選得到一株原果膠酶高產菌株并命名其為CD-01，其發(fā)酵產果膠的產率最高。其表型特征和黑曲霉相同，并且26S rRNA基因序列(554FR47D015)和黑曲霉(ATCC 64028)的相應片段序列相似度為100％，因此鑒定其為Aspergillus niger。 其次，通過比較果膠酶活和原果膠酶酶活的大小，采用L9(34)正交實驗設計和方差分析對發(fā)酵

3、生產果膠實驗條件進行了優(yōu)化，確定最佳發(fā)酵條件為：t=36h，T=35℃，pH=5，氮源為尿素。在以上條件下進行進一步的料液比進行優(yōu)化，得到最佳料液比為1:15，果膠產率達到24.5％。 最后，以果膠的產率為指標，對果膠的提取過程中乙醇的濃度進行了優(yōu)化，得到最佳的乙醇濃度為70％。在此基礎上，對發(fā)酵液中的果膠進行了提取和精制。精制的果膠符合果膠標準QB 2484-2000。另外，通過其紅外光譜和標準果膠紅外光譜的比較，確定該產品的