2型糖尿病大鼠骨折愈合與骨組織中OPG及OPGL表達(dá)的研究.pdf

1、目的:建立2型糖尿病大鼠動(dòng)物模型，并探討2型糖尿病大鼠骨保護(hù)素及其配體的變化與糖尿病骨折愈合障礙的關(guān)系。
　　 方法:20只健康雄性6周齡SD大鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組10只，喂以普通飼料;實(shí)驗(yàn)組10只，喂以高糖高脂飼料。4周后，實(shí)驗(yàn)組一次性腹腔注射鏈脲佐菌素（35mg/kg），對(duì)照組腹腔注射等量枸櫞酸鹽緩沖液。2周后，將空腹血糖不小于16.7mmol/L者劃入實(shí)驗(yàn)組繼續(xù)實(shí)驗(yàn)，并和對(duì)照組一塊建立大鼠左脛骨牽引成骨的動(dòng)物模型，從第二天起

2、開(kāi)始至第十四天，每天分兩次共0.3mm的方法持續(xù)延長(zhǎng)脛骨，兩周后停止延長(zhǎng)并予以致死劑量麻醉大鼠后迅速行牽引處X線攝片檢查，待動(dòng)物死亡后分別無(wú)菌收集血液標(biāo)本及脛骨標(biāo)本。將實(shí)驗(yàn)第4、6周及處死動(dòng)物時(shí)收集的血清標(biāo)本分別檢測(cè)甘油三酯、總膽固醇、胰島素和血糖。將保存好的脛骨標(biāo)本分別做免疫組化學(xué)分析和實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(cè)系統(tǒng)(Real-timeQuantitativePCRDetectingSystem，QPCR)檢查。
　　 結(jié)果:4

3、周后，測(cè)得實(shí)驗(yàn)組大鼠血清胰島素、甘油三酯和總膽固醇較對(duì)照組升高(P＜0.01)，空腹血糖則無(wú)明顯差異(P＞0.05)。6周后及實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，實(shí)驗(yàn)組大鼠甘油三酯、總膽固醇和空腹血糖較對(duì)照組升高(P＜0.01)，而血清胰島素則無(wú)明顯差異(P＞0.05)。骨組織HE染色顯示:實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組微骨柱縮短且排列紊亂，初始基質(zhì)前沿大部淺染。X線攝片則證明實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組在骨折斷端間形成骨痂明顯減少;免疫組化及QPCR檢查結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組骨痂組織中骨