延胡索堿及延胡索復(fù)方抗冠心病室性心律失常的實驗與臨床研究.pdf

1、目的: 通過動物實驗，比較藥物預(yù)處理與缺血預(yù)處理對心肌缺血再灌注損傷的作用效果，評價延胡索堿預(yù)處理對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其藥理作用機(jī)制。 方法與內(nèi)容:采用SD大鼠，隨機(jī)分為6組：假手術(shù)組、模型組、缺血預(yù)處理組、延胡索堿低、中、高劑量組。建立大鼠心肌缺血再灌注模型，運用膜片鉗技術(shù)、流式細(xì)胞儀技術(shù)、免疫組化、電鏡酶細(xì)胞化學(xué)和分子生物學(xué)等方法，從整體、細(xì)胞乃至分子基因水平探討延胡索堿預(yù)處理對大鼠心肌缺血再灌注損傷

2、的保護(hù)作用及其藥理作用機(jī)制。 結(jié)果: 1.室性心律失常發(fā)生率比較：延胡索堿中、高劑量組的室速(VT)和室顫 (VF)的發(fā)生率顯著降低，與模型組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)，延胡索堿低劑量組上述指標(biāo)變化無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與缺血預(yù)處理組比較，延胡索堿中、高劑量組的VT和VF的發(fā)生率變化無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。各組對室性早博(VPB)發(fā)生率的影響，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

3、 2.心律失常發(fā)生時間比較：延胡索堿低、中、高劑量組的心律失常出現(xiàn)時間明顯推遲、持續(xù)時間明顯縮短，與模型組比較差異有顯著性(P<0.01)。與缺血預(yù)處理組比較，延胡索堿預(yù)處理雖也能推遲心律失常出現(xiàn)時間、縮短心律失常持續(xù)時間，但作用較之減弱(P<0.01)。 3.ST段抬高程度比較：在心肌缺血30min，再灌注20min和60min時間點時，假手術(shù)組ST段抬高程度無明顯改變，模型組ST段則明顯抬高；與模型組比較，缺血預(yù)處理組和延

4、胡索堿預(yù)處理各劑量組ST段抬高幅度雖有所降低，但差異無顯著性(P>0.05)。心率變化比較：與模型組比較，延胡索堿低、中、高劑量組，以及缺血預(yù)處理組均能明顯減慢心率，差異有顯著性(P<0.01)；與缺血預(yù)處理組比較，延胡索低、中劑量組減慢心率的作用較之減弱(P<0.01)，延胡索堿高劑量組則較之增強(qiáng)(P<0.05)。 4.原位末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測大鼠心肌細(xì)胞凋亡結(jié)果：假手術(shù)組心肌僅偶見細(xì)胞凋亡發(fā)生，模型組可見大量胞核呈深

5、淺不一棕褐色的凋亡心肌細(xì)胞，心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯高于假手術(shù)組(P<0.01)；缺血預(yù)處理組和延胡索堿高、中、低劑量組凋亡心肌細(xì)胞和心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)均較模型組明顯減少(P<0.01)；而缺血預(yù)處理組和延胡索堿高劑量組間差異無顯著性(P>0.05)。 5.心肌細(xì)胞bcl-2 基因蛋白表達(dá)變化：與假手術(shù)組比較，抑凋亡基因bcl-2在缺血再灌注后表達(dá)明顯減少，心肌細(xì)胞bcl-2蛋白陽性表達(dá)指數(shù)(PEI)明顯低于假手術(shù)組(P<0.01)；

6、缺血預(yù)處理及用藥后bcl-2 表達(dá)增高，缺血預(yù)處理組和延胡索堿高、中、低劑量組bcl-2蛋白陽性表達(dá)指數(shù)(PEI)均較模型組組明顯增高(P<0.05)。而缺血預(yù)處理組和延胡索堿高劑量組比較，差異無顯著性(P>0.05)。 6.心肌細(xì)胞Fas基因蛋白表達(dá)變化：假手術(shù)組極少數(shù)心肌細(xì)胞Fas基因蛋白表達(dá)陽性；與假手術(shù)組比較，缺血再灌注后Fas基因蛋白表達(dá)明顯加強(qiáng)，心肌細(xì)胞Fas蛋白陽性表達(dá)指數(shù)(PEI)明顯高于假手術(shù)組(P<0.01)

7、；缺血預(yù)處理組和延胡索堿高、中、低劑量組Fas蛋白陽性表達(dá)指數(shù)(PEI)均較模型組明顯減少(P<0.05)：而缺血預(yù)處理組和延胡索堿高劑量組比較，差異無顯著性(P>0.05)。 7.心肌細(xì)胞Na<'+>，K<'+>-ATP 酶活力分析：與假手術(shù)組比較，心肌缺血再灌注損傷后，心肌細(xì)胞Na<'+>K<'+>-ATP酶活力顯著下降(P<0.01)。與模型組比較，除低劑量組(P>0.05)外，缺血預(yù)處理組和延胡索堿中、高劑量組的心肌細(xì)胞

8、Na<'+>K<'+>-ATP酶活力都明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)：與缺血預(yù)處理組比較，延胡索堿中、高劑量組心肌細(xì)胞Na<'+>-K<'+>-ATP酶活力差異無顯著性(P>0.05)。 8.心肌細(xì)胞Ca<'2+>-ATP 酶活力分析：與假手術(shù)組比較，心肌缺血再灌注損傷后，心肌細(xì)胞 Ca<'2+>-ATP 酶活力顯著下降(P<0.01)。與模型組比較，除低、中劑量組(P>0.05)外，缺血預(yù)處理組和延胡索堿高劑量組的

9、心肌細(xì)胞Ca<'2+>-ATP酶活力都明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)：與缺血預(yù)處理組比較，延胡索堿高劑量組心肌細(xì)胞Ca<'2+>-ATP酶活力差異無顯著性(P>0.05)。 9.單個心肌細(xì)胞膜上L-型鈣通道動力學(xué)變化 與假手術(shù)組比較，模型組平均電流幅值明顯增高(P<0.05)；與模型組比較，延胡索堿低、中劑量組可減弱 L-型鈣通道平均電流幅度值(P<0.05)，但缺血預(yù)處理組和延胡索堿高劑量組反而增強(qiáng)L-型鈣

10、通道電流幅度值(P<0.05)。 10.心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度比較：與假手術(shù)組比較，模型組心肌細(xì)胞內(nèi)平均鈣離子熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)(P<0.01)；與模型組比較，缺血預(yù)處理組與延胡索堿高、中、低劑量組平均鈣離子熒光強(qiáng)度減弱，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)；缺血預(yù)處理與延胡索堿高劑量組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 11.心肌缺血、梗死面積比較 (1)心肌缺血面積比較：與模型組比較，除低劑量組(P>0.05)

11、外，其余各組心肌缺血面積均有減少(P0.05)。 (2)心肌梗死面積比較：與模型組比較，缺血預(yù)處理組和延胡索堿高、中、低劑量組梗死面積均縮小(P<0.05)；與缺血預(yù)處理組比較，除低劑量組(P<0.01)外，延胡索堿高、中劑量組心肌梗死面積與其相當(dāng)，差異無顯著性(P>0.05)。 結(jié)論

12、: 1.對大鼠心肌缺血再灌注室性心律失常而言，延胡索堿預(yù)處理不僅可推遲其出現(xiàn)時間，縮短其持續(xù)時間，而且還可降低室速(VT)和室顫(VF)的發(fā)生率，減慢大鼠心肌缺血再灌注損傷后心率的增快。說明延胡索堿預(yù)處理具有抗大鼠心肌缺血再灌注室性心律失常的作用。 2．延胡索堿預(yù)處理可通過上調(diào)缺血再灌注心肌抑凋亡基因bcl-2 的蛋白表達(dá)和下調(diào)促凋亡基因Fas的蛋白表達(dá)，從而抑制心肌細(xì)胞凋亡的發(fā)生，保護(hù)心肌細(xì)胞免受缺血及缺血再灌注的損

13、傷，從而保護(hù)心臟功能，具有類似于缺血預(yù)處理的內(nèi)源性抗凋亡保護(hù)機(jī)制。 3．延胡索堿預(yù)處理能顯著提高心肌細(xì)胞 Na<'+>-K<'+>-ATPase、Ca<'2+>-ATPase 活性，通過肌漿網(wǎng) Ca<'2+>-ATP 酶 (肌漿網(wǎng)鈣泵)、Na<'+>-Ca<'2+>交換體系、肌膜Ca<'2+>-ATPas 等途徑將細(xì)胞內(nèi)Ca<'2+>運出細(xì)胞外，從而減輕心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度和鈣超載，起到保護(hù)心肌細(xì)胞的作用。 4．延胡索堿

14、預(yù)處理可降低心肌細(xì)胞膜上L-型鈣通道平均開放概率，并顯著減弱心肌細(xì)胞膜上L-型鈣通道平均電流幅度值，從而阻斷心肌細(xì)胞膜L-型鈣通道開放，減少“外鈣內(nèi)流”、“內(nèi)鈣釋放”，降低心肌細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子的濃度，避免了細(xì)胞內(nèi)鈣離子超載，發(fā)揮保護(hù)心肌細(xì)胞的作用。 5．延胡索堿預(yù)處理與經(jīng)典缺血預(yù)處理一樣，可顯著縮小大鼠心肌缺血再灌注的心肌梗死面積，對缺血再灌注心肌損傷有保護(hù)作用。 目的: 觀察延胡索復(fù)方桃仁紅花煎對冠心病頻發(fā)室性

15、早博患者的臨床療效。 方法與內(nèi)容:采用前瞻性試驗性設(shè)計方案。遵循隨機(jī)、對照、單盲原則進(jìn)行研究。將60例冠心病頻發(fā)室性早博患者按為1：l隨機(jī)分為試驗組與對照組。試驗組采用冠心病西醫(yī)基礎(chǔ)治療加上延胡索復(fù)方桃仁紅花煎治療，對照組僅采用單純西醫(yī)基礎(chǔ)治療，不用中醫(yī)中藥治療。通過觀察治療前后室性早博次數(shù)的變化以及中醫(yī)證候、癥狀的改變，比較試驗組與對照組二者間的臨床療效。 結(jié)果: 1．治療后兩組患者室性早搏療效比較：試驗組總有

16、效率85％，對照組75％，P>0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，說明兩組患者的療效相當(dāng)。 2．兩組患者治療前后24h室性早博次數(shù)的比較：試驗組和對照組治療前后自身比較，P<0.01，差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義。兩組患者治療前后24h室性早博次數(shù)差值比較，P>0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 3．兩組患者中醫(yī)證候療效比較：試驗組總有效率90％，對照組70％，經(jīng)X<'2>檢驗P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 4．兩組患者中醫(yī)癥狀積分

17、比較：治療前后自身比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。試驗組患者治療前后癥狀積分差值明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 5．兩組患者中醫(yī)癥狀療效比較：試驗組心悸中醫(yī)癥狀總有效率為89.7％，對照組為66.7％，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；試驗組胸悶中醫(yī)癥狀總有效率為76.9％％，對照組為45.8％，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)：余各中醫(yī)癥狀療效差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)