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文檔簡介
1、目的:卵巢惡性腫瘤嚴重威脅女性的健康,現已成為死亡率位于第三位的婦科惡性腫瘤。目前的治療方法還是以手術和輔助化療為主,但患者生存率未見明顯改善。研究發(fā)現人參皂苷-Rh2(Ginsenoside-Rh2,G-Rh2)對多種腫瘤細胞均有抑制細胞增殖、誘導凋亡的作用。但其在卵巢癌中的作用及其機制研究尚不清楚。本論文對G-Rh2在卵巢癌CAOV3細胞中的作用進行了研究,并對其作用機制進行了初步的探索。
方法:1.應用MTT方法檢測G-
2、Rh2對卵巢癌CAOV3細胞是否具有毒性,并測定其IC50值;2.熒光染色法進行細胞形態(tài)學觀察;3.采用流式細胞儀分析驗證是否存在細胞凋亡;4.應用Weston blot方法檢測Caspase-3特異性底物PARP的斷裂情況;5.體外分析凋亡細胞關鍵酶Caspase-3,-9的活性。
結果:1.G-Rh2對卵巢癌CAOV3細胞有抑制增殖的作用,且呈明顯的劑量效應關系,其IC50值為3.12ug/mL;2.在熒光顯微鏡下觀察到在
3、G-Rh2誘導的卵巢癌CAOV3細胞中出現了細胞變圓、膜發(fā)泡、細胞核固縮斷裂等細胞凋亡特有形態(tài)學變化;3.經過流式細胞儀(Annexin-V-PI復染法)分析檢測發(fā)現,G-Rh2作用24h后,CAOV3細胞早期凋亡和晚期凋亡的百分率分別為36.60%和26.47%,較對照組的1.59%和0.03%明顯增多;4.免疫印跡法檢測發(fā)現,藥物作用12h開始,Caspase-3特異性底物PARP發(fā)生明顯斷裂;5.Caspase活性檢測方法檢測到C
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