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1、目的:觀察人參皂苷Rg3對(duì)人卵巢癌細(xì)胞SKOV3侵襲作用的影響,并進(jìn)一步探討其機(jī)制。
方法:以生理鹽水為對(duì)照組,用濃度為12.5μmol/L(低劑量組)、25μmol/L(中劑量組)和50μmol/L(高劑量組)的人參皂苷Rg3分別處理體外培養(yǎng)的人卵巢癌SKOV3細(xì)胞24h,采用MTT檢測(cè)SKOV3細(xì)胞增殖活性,采用Transwell法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的侵襲能力,RT-PCR和Western blot法檢測(cè)細(xì)胞中VEGF、MMP-
2、2和MMP-9蛋白含量,免疫熒光檢測(cè)NF-κB的核轉(zhuǎn)位。
結(jié)果:12.5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L的人參皂苷 Rg3作用于SKOV3細(xì)24h后,其吸光度(OD值)與對(duì)照組相比,差異無(wú)顯著性(P>0.05),對(duì)SKOV3細(xì)胞的抑制率分別為2.98%、4.47%、7.46%。由此可見(jiàn)12.5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L人參皂苷Rg3對(duì)SKOV3細(xì)胞增殖無(wú)明顯影響。
應(yīng)用Trans
3、well法檢測(cè)12.5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L濃度人參皂苷Rg3作用24h后SKOV3細(xì)胞的侵襲能力,結(jié)果顯示對(duì)照組有85.44±10.52個(gè)細(xì)胞穿透基底膜,進(jìn)入侵襲小室下層;Rg3低劑量組有55.28±9.17個(gè)細(xì)胞進(jìn)入侵襲小室下層;Rg3中劑量組有27.69±5.65個(gè)細(xì)胞進(jìn)入侵襲小室下層;Rg3高劑量組有6.21±2.46個(gè)細(xì)胞進(jìn)入侵襲小室下層。
RT-PCR和Western blot結(jié)果顯示:1
4、2.5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L濃度人參皂苷Rg3處理24h后VEGF、MMP-2、MMP-9表達(dá)較對(duì)照組逐漸減少(P<0.05),并且隨著Rg3濃度增高,呈現(xiàn)劑量依賴(lài)性變化。
免疫熒光結(jié)果顯示:對(duì)照組細(xì)胞核染色較強(qiáng),表明 NF-κB從胞漿向胞核發(fā)生了轉(zhuǎn)移。12.5μmol/L、25μmol/L和50μmol/L濃度人參皂苷Rg3處理24h后,細(xì)胞核染色明顯下降。
結(jié)論:人參皂苷能使人卵巢癌細(xì)胞
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