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文檔簡介
1、研究目的:建立痰液誘導及處理方法;探討矽肺患者及接塵工人誘導痰中炎癥細胞及炎性介質含量變化,確定矽肺早期炎性標志物,建立矽肺早期無損傷的檢測方法。 研究方法: 1、痰液誘導和處理方法優(yōu)化:選擇Ⅰ期矽肺住院病人30名為研究對象,用不同濃度的高滲鹽溶液對研究對象進行不同持續(xù)時間的痰液誘導,觀察誘導液濃度和誘導時間對誘導痰液質量的影響;對誘導合格的痰液分別用不同倍數(shù)的DTT及不同的水浴時間進行處理,優(yōu)化誘導痰液的處理方法。
2、 2、矽肺患者及接塵工人誘導痰中炎癥細胞及炎性介質水平變化:分別選擇矽塵接觸工人、矽肺患者和無粉塵接觸史后勤人員為接塵實驗組、矽肺實驗組和對照組,對三組人員進行痰液誘導并測定誘導痰中的TNF-α、IL-6、IL-16、MCP-1、MIP-1α含量;進行痰液涂片,用光學顯微鏡觀察誘導痰中炎癥細胞(中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、塵細胞)數(shù)量變化;同時測定研究對象的用力肺活量(FVC)、第一秒用力呼氣量(FEV1)、第一秒用力呼氣量占預
3、計值的百分比(FEV1/FVC)、FEF25-75、MEF25、MEF50、MEF75及最大用力呼氣流速(PEF);進行炎癥細胞、炎性介質與接塵工齡和肺功能指標的相關性分析。 研究結果: (1)3%、4%高滲鹽水的誘導成功率顯著高于5%濃度的誘導成功率(P<0.05),3%與4%濃度之間誘導成功率無顯著性差異(P>0.05);水浴時間超過30min后痰液溶解率較高(P<0.05),處理后較稀薄,處理20min的痰液未完全
4、溶解,粘稠度較高;不同體積的DTT溶解方式處理結果并無明顯差異(P<0.05)。 (2)接塵組及病例組白細胞總數(shù)顯著高于對照組(P<0.05);接塵組與病例組之間白細胞總數(shù)無明顯差異(P>0.05);接塵組及病例組中性粒細胞數(shù)顯著低于對照組(P<0.05);接塵組及病例組淋巴細胞數(shù)顯著高于對照組(P<0.05);接塵組與病例組之間中性粒細胞數(shù)、淋巴細胞數(shù)均無明顯差異(P>0.05);三組間單核細胞數(shù)無明顯差異(P>0.05);接
5、塵組與病例組塵細胞數(shù)顯著高于對照組(P<0.05)。 (3)病例組誘導痰中TNF-α水平明顯高于其他兩組,差異均有顯著性意義(P<0.05);接塵組與對照組間TNF-α含量差異無顯著性(P>0.05)。 (4)三組研究對象誘導痰中IL-6含量無差異(P>0.05)。 (5)矽肺患者和接塵工人組誘導痰中IL-16含量明顯高于對照組(P<0.05;P<0.05),病例組誘導痰中IL-16含量高于接塵組中IL-16水平
6、,二者有顯著性差異(P<0.05)。 (6)接塵組和病例組誘導痰中MCP-1含量均高于對照組MCP-1含量,病例組誘導痰中MCP-1含量高于接塵組含量,三組間MCP-1含量有顯著性差異(P<0.05;P<0.05)。MCP-1與白細胞總數(shù)、中性粒細胞、單核細胞、塵細胞具有顯著的相關性(P<0.05),與淋巴細胞無相關性(P>0.05)。 (7)病例組、接塵組與對照組之間MIP-1α水平無顯著性差異(P>0.05)。
7、 (8)TNF-α與FVC、FEV1、MEF25、MEF50、MEF75均呈明顯的負相關(P<0.05);IL-6與FEV1、FEV1/FVC呈明顯的負相關(P<0.05);IL-16與FVC、FEV1、FEV1/FVC、FEF25-75、PEF皆呈明顯的負相關(P<0.05);MCP-1、MIP-1α與各肺功能指標均不呈明顯的相關性(P>0.05)。 (9)TNF-α、IL-16、MCP-1與接塵工齡有明顯的相關性(P<0.
8、05)。 研究結論: 1.痰液誘導技術可以作為一種無創(chuàng)傷、安全、簡便、實用的試驗方法用于收集研究對象的痰液,且收集的樣品質量較好,代表性較高;通過對痰液處理方法的優(yōu)化,所得實驗數(shù)據(jù)能夠反映矽肺發(fā)生發(fā)展過程中肺組織的炎癥反應狀況。 2.誘導痰中淋巴細胞、塵細胞數(shù)量以及TNF-α、IL-16、MCP-1水平的變化可以反映矽肺進展中肺部炎癥反應程度的變化;IL-6含量與研究對象肺功能指標有較好的相關性,能夠反映其肺功能
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