黑米、黑豆花色苷提取工藝、穩(wěn)定性及其生物活性的研究.pdf

1、花色苷是一類廣泛存在于植物的花、果實(shí)和葉中的水溶性天然色素，屬于黃酮多酚類化合物?，F(xiàn)有研究表明，天然花色苷具有抗氧化、抗突變、抗癌、抗炎、抗衰老等多項(xiàng)生物活性。國(guó)內(nèi)研究表明，黑米和黑豆中含有豐富的花色苷。本論文對(duì)黑米和黑豆中花色苷的提取工藝、不同因素對(duì)其穩(wěn)定性的影響以及體內(nèi)抗氧化、護(hù)肝等生物活性進(jìn)行了系統(tǒng)研究。
　　 用適量蒸餾水分別提取黑米、黑豆中的總花色苷，用1.0mol/L的HCL溶液調(diào)節(jié)pH為2.0，在60℃下水浴提取5

2、次至提取液無(wú)顏色，收集各次提取液，測(cè)定其總體積。離心后在530nm下測(cè)定吸光度，可以確定黑米、黑豆中總花色苷含量分別為6.75mg/g和4.70mg/g。采用家庭煮制黑米、黑豆的方式沸水煮40min，測(cè)定其提取液的吸光度值，此種方式下黑米花色苷含量為3.22mg/g，得率為總花色苷的47.72％;黑豆花色苷含量為2.17mg/g，得率為黑豆中總花色苷的46.21％。
　　 分別采用醇提法和水提法兩種提取方法對(duì)黑米、黑豆中花色苷進(jìn)

3、行提取。醇提法中對(duì)乙醇濃度、提取時(shí)間、提取溫度及料液比進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，水提法中對(duì)提取時(shí)間、提取溫度及料液比進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)，并根據(jù)上述單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以吸光度值和得率為檢驗(yàn)指標(biāo)分別設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，從而得到兩種花色苷醇提法和水提法的最佳提取工藝為：醇提黑米為乙醇濃度40％，提取時(shí)間80min，提取溫度70℃，料液比1:8，花色苷得率達(dá)85.63％;水提黑米為提取時(shí)間120min，提取溫度80℃，料液比1:6，得率達(dá)87.13％。醇提黑豆為乙醇

4、濃度60％，提取時(shí)間80min，提取溫度50℃，料液比1:6，得率為84.21％;水提黑豆為提取時(shí)間80min，提取溫度60℃，料液比1:8，得率達(dá)89.04％。
　　 研究了不同溫度、pH、光照、金屬離子(Mg2+、Al3+、Ca2+、Cu2+、Fe3+、Fe2+、Zn2+)和不同種類的食品添加劑等對(duì)黑米、黑豆兩種花色苷穩(wěn)定性的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，兩種花色苷耐熱性、耐光性均較差，酸性條件下比較穩(wěn)定。相同光照條件下，黑豆花色苷比

5、黑米花色苷穩(wěn)定。Al3+、Ca2+、Zn2+對(duì)兩種花色苷有保護(hù)作用，Cu2+、Fe2+、Fe3+對(duì)花色苷的穩(wěn)定性都有一定程度的減弱。向上述不同金屬離子的花色苷溶液中加入20.0mg的EDTA后，發(fā)現(xiàn)Cu2+對(duì)兩種花色苷穩(wěn)定性的減弱受到了明顯抑制，同時(shí)Zn2+的保護(hù)作用受到了破壞；EDTA加劇了Fe3+對(duì)黑米花色苷穩(wěn)定性的破壞，而抑制了對(duì)黑豆花色苷穩(wěn)定性的破壞，F(xiàn)e2+恰好相反。以花色苷水溶液作為對(duì)照，加入β-環(huán)狀糊精和山梨酸鉀的黑米花色

6、苷溶液經(jīng)過(guò)高溫水浴處理，花色苷保持率分別是89.6％和85.7％，高于對(duì)照組的74.9％，CMC對(duì)黑米花色苷無(wú)明顯的影響，富馬酸和明膠則在一定程度上破壞了其穩(wěn)定性，高溫處理后保持率僅為64.2％和69.0％。加入β-環(huán)狀糊精、富馬酸、山梨酸鉀都很大程度上抑制了黑豆花色苷的降解，高溫處理前后保持率都達(dá)到87％以上，很好的保護(hù)了花色苷在溶液中的穩(wěn)定性，CMC和明膠的加入使黑豆花色苷穩(wěn)定性略微降低，降低幅度不超過(guò)5％，影響不明顯。
　　

7、 采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)黑米、黑豆花色苷的體內(nèi)抗氧化、護(hù)肝功能進(jìn)行了初步研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，黑米、黑豆花色苷都能顯著提高衰老小鼠血清中總SOD活力和CAT活力(p＜0.05)，極顯著降低了其中MDA含量(p＜0.01)，三組小鼠死亡率均為20％，說(shuō)明兩種花色苷具有較為顯著的體內(nèi)抗氧化作用；黑米、黑豆花色苷都極顯著降低了酒精肝損傷小鼠血清中AST的活性(p＜0.01)，顯著降低了ALT活性(p＜0.05)，顯示兩種花色苷都具有一定的體內(nèi)護(hù)肝功能