CysC對(duì)膿毒癥預(yù)后的評(píng)估價(jià)值和IRAKM基因多態(tài)性與膿毒癥關(guān)系的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:膿毒癥(sepsis)是臨床ICU病人死亡的重要原因,近年來(lái)醫(yī)學(xué)界對(duì)膿毒癥的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行深入的探討和研究,但至今尚未能充分闡明其發(fā)病機(jī)制。在危重患者中,常導(dǎo)致多器官功能衰竭,其中腎臟是最易受損的靶器官之一。膿毒癥的患者約42%伴有不同程度急性腎損傷。大量臨床研究顯示,腎功能輕度損傷即可導(dǎo)致患者病死率增加。目前臨床上反應(yīng)腎小球慮過(guò)功能的指標(biāo)如尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(Serum creatin

2、ine,Scr)、內(nèi)生肌酐清除率(clearance rate of endogenous creatinine,Ccr)等都存在一定的局限性,且不同程度地受到一些腎外因素的干擾。胱抑素C(CystatinC,CysC)是一種反映腎小球慮過(guò)率(glomerular filtration rate,GFR)和早期腎損傷的內(nèi)源性標(biāo)志物。比Scr更準(zhǔn)確地反映GFR。如果通過(guò)檢測(cè)血清中的CysC濃度,能在GFR開(kāi)始下降時(shí),或在腎臟有輕微損傷而G

3、FR尚正常的階段及時(shí)發(fā)現(xiàn),及早干預(yù),將有助于降低膿毒癥患者的病死率。
  流行病學(xué)調(diào)查顯示,黑人膿毒癥易感性比白人高,死亡率也明顯高于其他人種,故遺傳因素對(duì)膿毒癥的易感性和臨床轉(zhuǎn)歸具有重要作用。白介素1受體相關(guān)激酶M((interlukin-lrecepter associated kinaseM,IRAKM)是Toll樣受體(Toll-like receptors,TLR)信號(hào)途徑中的負(fù)向調(diào)節(jié)因子,在多種感染性及非感染性疾病中,

4、IRAKM可通過(guò)抑制前炎癥因子的產(chǎn)生而調(diào)節(jié)免疫自穩(wěn)和免疫耐受。在膿毒癥的發(fā)展過(guò)程中IRAKM發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。但目前對(duì)IRAKM基因多態(tài)性是否與膿毒癥易感性和預(yù)后相關(guān),國(guó)內(nèi)外研究較少。
  本研究以53例膿毒癥患者為研究對(duì)象,探討血清CysC對(duì)膿毒癥預(yù)后的評(píng)估價(jià)值以及IRAKM+22148位點(diǎn)的基因多態(tài)性與膿毒癥易感性和預(yù)后的關(guān)系。通過(guò)測(cè)定血清TNF-α和IL-6水平判斷IRAKM+22148位點(diǎn)的變異是否影響下游細(xì)胞因子的表達(dá)

5、。
  方法:1.免疫比濁法測(cè)定血清CysC的水平,將53例膿毒癥患者分為存活組和死亡組,存活組36例,死亡組17例,采用t檢驗(yàn)比較兩組間血清CysC的水平,分析血清CysC對(duì)膿毒癥預(yù)后的評(píng)估價(jià)值。2.人全血基因組DNA提取試劑盒提取外周血DNA,根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)設(shè)計(jì)聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chainreaction,PCR)引物,擴(kuò)增IRAKM基因+22148位點(diǎn)附近序列,采用PCR-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(restric

6、t fragment length polymorphisms,RLFP)的方法進(jìn)行基因多態(tài)性分析。3.采用X2檢驗(yàn)比較膿毒癥組與對(duì)照組基因型頻率及等位基因頻率分布差異,分析IRAKM+22148位點(diǎn)基因多態(tài)性與膿毒癥易感性的關(guān)系。計(jì)算等位基因OR值和95%可信區(qū)間評(píng)價(jià)其相對(duì)患病風(fēng)險(xiǎn)。4.采用X2檢驗(yàn)比較不同基因型膿毒癥患者的病死率,分析IRAKM+22148位點(diǎn)基因多態(tài)性是否與膿毒癥預(yù)后相關(guān)。5.應(yīng)用酶聯(lián)免疫分析(Enzyme lin

7、ked immunosorbentassay,ELISA)測(cè)定血清TNF-a和IL-6的水平,采用t檢驗(yàn)比較不同基因型膿毒癥患者血清TNF-a和IL-6的水平。
  結(jié)果:1.膿毒癥死亡組CysC水平高于存活組。2.中國(guó)漢族人群存在IRAKM+22148位點(diǎn)基因多態(tài)性,即GG、GA和AA三種基因型。但病例組與對(duì)照組比較基因型頻率分布差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而兩組間等位基因頻率分布差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。膿毒癥患者G等位基因頻率高于對(duì)照組OR

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