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文檔簡介
1、文章從以下兩部分就精索靜脈曲張模型大鼠睪丸prokineticin 2表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)行了綜述。
第一部分大鼠睪丸固定劑的選擇
目的:比較4%多聚甲醛、改良Davidson固定劑及Bouin液三種不同固定劑固定大鼠睪丸后的形態(tài)學(xué)特點(diǎn),以找到最為適宜的睪丸形態(tài)固定劑。
方法:10只SD大鼠的睪丸被剪成兩半分別固定于三種不同固定劑,常規(guī)脫水、透明、浸蠟、包埋,石蠟切片機(jī)連續(xù)切片,HE常規(guī)染色。
結(jié)果:
2、固定于4%多聚甲醛中的睪丸有明顯縮水,生精小管之間的縮水尤其嚴(yán)重。Bouin液固定的睪丸,亦有不同程度的縮水,主要表現(xiàn)在睪丸組織的中央。改良 Davidson固定劑固定的睪丸無明顯縮水,只在生精細(xì)胞之間觀察到輕微縮水。細(xì)胞核在改良Davidson固定劑和Bouin液固定的睪丸中的形態(tài)要比4%多聚甲醛中的清晰。
結(jié)論:相比Bouin液與4%多聚甲醛兩種固定劑,改良Davidson固定劑對(duì)保存大鼠睪丸的形態(tài)更佳。
第二部
3、分精索靜脈曲張模型大鼠睪丸prokineticin2的表達(dá)
目的:研究精索靜脈曲張對(duì)大鼠睪丸組織prokineticin2表達(dá)的影響,探討精索靜脈曲張引起不育的病理機(jī)制。
方法:選用雄性SD大鼠48只,分為假手術(shù)組(n=6×3),手術(shù)組(n=10×3)。采用左腎靜脈縮窄法建立精索靜脈曲張動(dòng)物模型,并于(假)手術(shù)后2周、4周及8周分別獲取左側(cè)睪丸,采用半定量RT-PCR法檢測prokineticin2 mRNA的含量,
4、免疫組織化學(xué)法檢測prokineticin2蛋白質(zhì)在睪丸中的定位及含量(半定量分析)。
結(jié)果:mRNA水平:prokineticin2在精索靜脈曲張的大鼠睪丸中表達(dá)升高,除4周組以外,與對(duì)照組比有顯著性差異(P<0.05),4周組同2周組比較顯著下降。免疫組織化學(xué)顯示prokineticin2主要表達(dá)于精原細(xì)胞,其次是初級(jí)精母細(xì)胞,定位于細(xì)胞核;長形精子細(xì)胞、支持細(xì)胞、管周肌樣細(xì)胞及間質(zhì)血管內(nèi)皮細(xì)胞也有陽性表達(dá);精子及間質(zhì)細(xì)胞
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