益腎通絡(luò)方對(duì)實(shí)驗(yàn)性精索靜脈曲張大鼠睪丸Bcl-2、Fas、FasL表達(dá)的影響.pdf

1、目的:本項(xiàng)目旨在通過(guò)從細(xì)胞凋亡、形態(tài)學(xué)的角度研究益腎通絡(luò)方對(duì)精索靜脈曲張性不育的作用機(jī)制,為中醫(yī)藥診治精索靜脈曲張性不育提供較為科學(xué)的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:將75只大鼠普通飼養(yǎng)7天,觀察無(wú)異常后即可造模。模型的制備參照Saypol法縮窄完成左腎靜脈后,仔細(xì)尋找左精索內(nèi)靜脈與左髂總靜脈之間的交通支,確定后仔細(xì)分離結(jié)扎。假手術(shù)組只行腎靜脈分離,不縮窄左腎靜脈。造模完成后48天開(kāi)始給藥。將造模成功的大鼠按隨機(jī)數(shù)字表分為4組,每組1

2、5只,分別給予益腎通絡(luò)方低劑量、益腎通絡(luò)方中劑量、益腎通絡(luò)方高劑量、模型對(duì)照組,剩余的15只假手術(shù)組大鼠作為空白對(duì)照組。連續(xù)給藥60天后每組隨機(jī)取10只大鼠,脫臼處死,打開(kāi)腹腔,取出左側(cè)睪丸,立即用4％多聚甲醛溶液固定24小時(shí)以上,然后用免疫組化技術(shù)檢測(cè)睪丸生精細(xì)胞凋亡蛋白Bcl-2、Fas和Fas的表達(dá),用電鏡觀察睪丸組織超微結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果:
　　1、凋亡基因
　　1.1、Bcl-2基因的表達(dá)模型對(duì)照組大鼠睪丸組織

3、中各級(jí)生精細(xì)胞中Bcl-2蛋白陽(yáng)性表達(dá)比空白對(duì)照組顯著降低(P<0.01);益腎通絡(luò)方低劑量組大鼠睪丸組織中各級(jí)生精細(xì)胞中Bcl-2蛋白陽(yáng)性表達(dá)較模型對(duì)照組升高(P<0.05);益腎通絡(luò)方中、高劑量組大鼠睪丸組織中各級(jí)生精細(xì)胞中Bcl-2蛋白陽(yáng)性表達(dá)較模型對(duì)照組明顯升高(P<0.01);益腎通絡(luò)方高劑量組大鼠睪丸組織中各級(jí)生精細(xì)胞中Bcl-2蛋白陽(yáng)性表達(dá)與空白對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　1.2、Fas基因的表達(dá)模型對(duì)

4、照組大鼠睪丸組織中各級(jí)生精細(xì)胞中Fas蛋白陽(yáng)性表達(dá)比空白對(duì)照組顯著升高(P<0.01);益腎通絡(luò)方低劑量組大鼠睪丸組織中各級(jí)生精細(xì)胞中Fas蛋白陽(yáng)性表達(dá)較模型對(duì)照組降低(P<0.05);益腎通絡(luò)方中、高劑量組大鼠睪丸組織中各級(jí)生精細(xì)胞中Fas蛋白陽(yáng)性表達(dá)較模型對(duì)照組明顯降低(P<0.01);益腎通絡(luò)方高劑量組大鼠睪丸組織中各級(jí)生精細(xì)胞中Fas蛋白陽(yáng)性表達(dá)與空白對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。1.3FasL基因的表達(dá)模型對(duì)照組大鼠睪丸

5、組織中各級(jí)生精細(xì)胞中FasL蛋白陽(yáng)性表達(dá)比空白對(duì)照組顯著升高(P<0.01);益腎通絡(luò)方低劑量組大鼠睪丸組織中各級(jí)生精細(xì)胞中Fasl蛋白陽(yáng)性表達(dá)較模型對(duì)照組降低P<0.05);益腎通絡(luò)方中、高劑量組大鼠睪丸組織中各級(jí)生精細(xì)胞中Fasl蛋白陽(yáng)性表達(dá)較模型對(duì)照組明顯降低(P<0.01);益腎通絡(luò)方高劑量組大鼠睪丸組織中各級(jí)生精細(xì)胞中FasL蛋白陽(yáng)性表達(dá)與空白對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　2、光鏡下睪丸組織的形態(tài)
　　

6、空白對(duì)照組大鼠睪丸組織正常,模型大鼠睪丸組織可見(jiàn)明顯的病理性改變,益腎通絡(luò)方低劑量組大鼠睪丸組織的病理性改變較模型組稍減輕,益腎通絡(luò)方中劑量組大鼠睪丸組織的病理性改變較模型組減輕,高劑量組大鼠睪丸組織的病理性改變較模型組顯著減輕,各組大鼠睪丸組織病理學(xué)改變有明顯差別。
　　結(jié)論:
　　1、實(shí)驗(yàn)性青春期精索靜脈曲張可引起雙側(cè)睪丸生精細(xì)胞的促進(jìn)凋亡基因Fas、FasL表達(dá)增多和抑制凋亡基因Bcl-2減少;實(shí)驗(yàn)性精索靜脈曲張大鼠睪