益腎通絡方對實驗性精索靜脈曲張大鼠睪丸Bcl-2、Fas、FasL表達的影響.pdf

1、目的:本項目旨在通過從細胞凋亡、形態(tài)學的角度研究益腎通絡方對精索靜脈曲張性不育的作用機制,為中醫(yī)藥診治精索靜脈曲張性不育提供較為科學的理論和實驗依據。
　　方法:將75只大鼠普通飼養(yǎng)7天,觀察無異常后即可造模。模型的制備參照Saypol法縮窄完成左腎靜脈后,仔細尋找左精索內靜脈與左髂總靜脈之間的交通支,確定后仔細分離結扎。假手術組只行腎靜脈分離,不縮窄左腎靜脈。造模完成后48天開始給藥。將造模成功的大鼠按隨機數字表分為4組,每組1

2、5只,分別給予益腎通絡方低劑量、益腎通絡方中劑量、益腎通絡方高劑量、模型對照組,剩余的15只假手術組大鼠作為空白對照組。連續(xù)給藥60天后每組隨機取10只大鼠,脫臼處死,打開腹腔,取出左側睪丸,立即用4％多聚甲醛溶液固定24小時以上,然后用免疫組化技術檢測睪丸生精細胞凋亡蛋白Bcl-2、Fas和Fas的表達,用電鏡觀察睪丸組織超微結構。
　　結果:
　　1、凋亡基因
　　1.1、Bcl-2基因的表達模型對照組大鼠睪丸組織

3、中各級生精細胞中Bcl-2蛋白陽性表達比空白對照組顯著降低(P<0.01);益腎通絡方低劑量組大鼠睪丸組織中各級生精細胞中Bcl-2蛋白陽性表達較模型對照組升高(P<0.05);益腎通絡方中、高劑量組大鼠睪丸組織中各級生精細胞中Bcl-2蛋白陽性表達較模型對照組明顯升高(P<0.01);益腎通絡方高劑量組大鼠睪丸組織中各級生精細胞中Bcl-2蛋白陽性表達與空白對照組無顯著性差異(P>0.05)。
　　1.2、Fas基因的表達模型對

4、照組大鼠睪丸組織中各級生精細胞中Fas蛋白陽性表達比空白對照組顯著升高(P<0.01);益腎通絡方低劑量組大鼠睪丸組織中各級生精細胞中Fas蛋白陽性表達較模型對照組降低(P<0.05);益腎通絡方中、高劑量組大鼠睪丸組織中各級生精細胞中Fas蛋白陽性表達較模型對照組明顯降低(P<0.01);益腎通絡方高劑量組大鼠睪丸組織中各級生精細胞中Fas蛋白陽性表達與空白對照組無顯著性差異(P>0.05)。1.3FasL基因的表達模型對照組大鼠睪丸

5、組織中各級生精細胞中FasL蛋白陽性表達比空白對照組顯著升高(P<0.01);益腎通絡方低劑量組大鼠睪丸組織中各級生精細胞中Fasl蛋白陽性表達較模型對照組降低P<0.05);益腎通絡方中、高劑量組大鼠睪丸組織中各級生精細胞中Fasl蛋白陽性表達較模型對照組明顯降低(P<0.01);益腎通絡方高劑量組大鼠睪丸組織中各級生精細胞中FasL蛋白陽性表達與空白對照組無顯著性差異(P>0.05)。
　　2、光鏡下睪丸組織的形態(tài)
　　

6、空白對照組大鼠睪丸組織正常,模型大鼠睪丸組織可見明顯的病理性改變,益腎通絡方低劑量組大鼠睪丸組織的病理性改變較模型組稍減輕,益腎通絡方中劑量組大鼠睪丸組織的病理性改變較模型組減輕,高劑量組大鼠睪丸組織的病理性改變較模型組顯著減輕,各組大鼠睪丸組織病理學改變有明顯差別。
　　結論:
　　1、實驗性青春期精索靜脈曲張可引起雙側睪丸生精細胞的促進凋亡基因Fas、FasL表達增多和抑制凋亡基因Bcl-2減少;實驗性精索靜脈曲張大鼠睪