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文檔簡介
1、目的:類風濕性關節(jié)炎是一種常見的慢性自身免疫性關節(jié)疾病,其致病原因及病理過程一直是研究熱點。為研究氧化應激狀態(tài)特別是谷氨酰半胱氨酸連接酶對類風濕性關節(jié)炎疾病過程的影響,我們采用適當方法對谷氨酰半胱氨酸連接酶催化亞單位和調節(jié)亞單位在類風濕性關節(jié)炎患者體內的改變進行分析,以說明氧化應激在類風濕性關節(jié)炎發(fā)病中的意義。
方法:采集類風濕性關節(jié)炎患者及健康對照清晨空腹靜脈血,采用免疫比濁法檢測RF、CRP、C3、C4、IgG、IgA、I
2、gM,儀器法檢測血沉,ELISA法檢測抗CCP抗體;使用Ficoll Hypaque淋巴細胞分層液密度梯度離心分離外周血單個核細胞,提取外周血淋巴細胞 RNA,反轉錄,采用實時熒光定量 PCR對谷氨酰半胱氨酸連接酶的催化亞基和調節(jié)亞基的基因表達水平進行分析,以溶解曲線驗證實時熒光定量PCR實驗擴增特異性。
結果:類風濕性關節(jié)炎患者組實驗室數據表現(xiàn),抗CCP抗體、RF、CRP、血沉升高,C4降低,IgG升高。與對照組相比較,類風
3、濕性關節(jié)炎病人外周血淋巴細胞中的谷氨酰半胱氨酸連接酶催化亞基基因和調節(jié)亞基基因表達明顯下降(谷氨酰半胱氨酸連接酶催化亞基基因:RA組1±0.018,對照組3.62±0.429;p<0.01。谷氨酰半胱氨酸連接酶調節(jié)亞基基因:RA組1±0.03,對照組2.97±0.467;p<0.01)。
結論:谷氨酰半胱氨酸連接酶的催化亞基和調節(jié)亞基在類風濕性關節(jié)炎病人的疾病過程中發(fā)生明顯的改變,其基因表達水平明顯下降,說明谷胱甘肽代謝及機體
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