谷氨酰半胱氨酸連接酶在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中基因表達(dá)變化的研究.pdf

1、目的：類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一種常見的慢性自身免疫性關(guān)節(jié)疾病，其致病原因及病理過程一直是研究熱點(diǎn)。為研究氧化應(yīng)激狀態(tài)特別是谷氨酰半胱氨酸連接酶對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疾病過程的影響，我們采用適當(dāng)方法對(duì)谷氨酰半胱氨酸連接酶催化亞單位和調(diào)節(jié)亞單位在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者體內(nèi)的改變進(jìn)行分析，以說明氧化應(yīng)激在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)病中的意義。
　　方法：采集類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者及健康對(duì)照清晨空腹靜脈血，采用免疫比濁法檢測(cè)RF、CRP、C3、C4、IgG、IgA、I

2、gM，儀器法檢測(cè)血沉，ELISA法檢測(cè)抗CCP抗體；使用Ficoll Hypaque淋巴細(xì)胞分層液密度梯度離心分離外周血單個(gè)核細(xì)胞，提取外周血淋巴細(xì)胞 RNA，反轉(zhuǎn)錄，采用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR對(duì)谷氨酰半胱氨酸連接酶的催化亞基和調(diào)節(jié)亞基的基因表達(dá)水平進(jìn)行分析，以溶解曲線驗(yàn)證實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增特異性。
　　結(jié)果：類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者組實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)表現(xiàn)，抗CCP抗體、RF、CRP、血沉升高，C4降低，IgG升高。與對(duì)照組相比較，類風(fēng)

3、濕性關(guān)節(jié)炎病人外周血淋巴細(xì)胞中的谷氨酰半胱氨酸連接酶催化亞基基因和調(diào)節(jié)亞基基因表達(dá)明顯下降（谷氨酰半胱氨酸連接酶催化亞基基因：RA組1±0.018，對(duì)照組3.62±0.429；p＜0.01。谷氨酰半胱氨酸連接酶調(diào)節(jié)亞基基因：RA組1±0.03，對(duì)照組2.97±0.467；p＜0.01)。
　　結(jié)論：谷氨酰半胱氨酸連接酶的催化亞基和調(diào)節(jié)亞基在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病人的疾病過程中發(fā)生明顯的改變，其基因表達(dá)水平明顯下降，說明谷胱甘肽代謝及機(jī)體