Syndecan-1和EMMPRIN在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:卵巢腫瘤為女性生殖器官三大惡性腫瘤之一，由于缺乏明確的早期診斷方法，約2/3的患者在診斷時已屬晚期，其5年生存率少于30％，在婦科惡性腫瘤中的死亡率最高[1]。近年來由于手術(shù)方式及放化療方案的改進，使卵巢生殖細(xì)胞惡性腫瘤的生存率和預(yù)后有了很大的改善，但對于上皮性卵巢癌，由于其手術(shù)或化療后復(fù)發(fā)率高，5年生存率始終沒有明顯改善。直接蔓延及腹腔種植是卵巢癌主要的轉(zhuǎn)移途徑，但其作用機理尚不清楚，因此研究其浸潤、轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素，尋找新的治療

2、靶點具有重大的現(xiàn)實意義。Syndecan-1屬于跨膜硫酸乙酰肝素蛋白多糖家族成員，能通過參與細(xì)胞-細(xì)胞間粘附、細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)粘附、影響腫瘤的遷移性、維持細(xì)胞分化表型而在細(xì)胞調(diào)節(jié)過程中發(fā)揮作用，其表達(dá)降低會加速腫瘤細(xì)胞的生長和遷移。EMMPRIN屬于免疫蛋白超家族，能刺激間質(zhì)內(nèi)的成纖維細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)蛋白水解酶(MMP)，而降解細(xì)胞基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)，促進腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。本研究采用免疫組織化學(xué)方法和RT-PCR方法檢測Syndeca

3、n-1蛋白、mRNA和EMMPRIN蛋白、RNA在卵巢良性腫瘤、卵巢交界性腫瘤和上皮性卵巢癌內(nèi)的表達(dá)、兩者的相關(guān)性，及其與上皮性卵巢癌病理類型、分化程度、和臨床分期的關(guān)系，為卵巢上皮性腫瘤的診斷及其上皮性卵巢癌浸潤、轉(zhuǎn)移的機制提供實驗依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.標(biāo)本選擇:收集河北醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院接受婦科手術(shù)治療的上皮性卵巢腫瘤標(biāo)本。所有標(biāo)本均分別經(jīng)立即液氮保存和10％福爾馬林固定。術(shù)后經(jīng)病理證實，包括卵巢上皮性癌

4、46例，交界性卵巢腫瘤20例，卵巢囊腺瘤17例，其中卵巢癌患者術(shù)前均未經(jīng)化療、放療等任何治療手段的干預(yù)。
　　 2.10％福爾馬林固定的標(biāo)本，經(jīng)石蠟包埋后，制成4um切片，應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測Syndecan-1和EMMPRIN蛋白在卵巢上皮性癌，交界性卵巢腫瘤和卵巢良性腫瘤內(nèi)的表達(dá)情況。經(jīng)液氮保存的標(biāo)本，應(yīng)用RT-PCR方法檢測Syndecan-1mRNA和EMMPRINmRNA在卵巢上皮性癌，交界性卵巢腫瘤和卵巢良性腫

5、瘤內(nèi)的表達(dá)情況。
　　 3.統(tǒng)計學(xué)處理:收集實驗數(shù)據(jù)，應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，分析Syndecan-1蛋白、mRNA和EMMPRIN蛋白、mRNA在癌組織、交界性腫瘤組織、良性腫瘤組織中的表達(dá)水平，并分析二者的表達(dá)水平與卵巢上皮性癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1.Syndecan-1蛋白在卵巢良性腫瘤、卵巢交界性腫瘤和上皮性卵巢癌中的陽性表達(dá)率分別為82.35％(14/17)

6、，65％(13/20)，39.13％(18/46)。Syndecan-1mRNA在卵巢良性腫瘤內(nèi)的相對表達(dá)量為1.25±0.22，卵巢交界性腫瘤的相對表達(dá)量為1.08±0.21，上皮性卵巢癌的相對表達(dá)量為0.91±0.24。Syndecan-1蛋白和mRNA在卵巢良性腫瘤內(nèi)的表達(dá)同上皮性卵巢癌比較有顯著性差異，良性腫瘤同卵巢交界性腫瘤，卵巢交界性腫瘤與上皮性卵巢癌之間比較，其差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.EMMP

7、RIN蛋白在卵巢良性腫瘤、卵巢交界性腫瘤和上皮性卵巢癌中的陽性表達(dá)率分別為29.41％(5/17)，35％(7/20)，80.43％(37/46)。EMMPRINmRNA在卵巢良性腫瘤的相對表達(dá)量為0.45±0.26，卵巢交界性腫瘤的相對表達(dá)量為1.10±0.21，上皮性卵巢癌的相對表達(dá)量為1.35±0.23，EMMPRIN蛋白和mRNA在卵巢良性腫瘤內(nèi)的表達(dá)、在卵巢交界性腫瘤內(nèi)的表達(dá)分別同卵巢上皮性癌比較有差異，卵巢良性腫瘤同交界性腫

8、瘤之間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3.將46例上皮性卵巢癌中的Syndecan-1蛋白的陽性表達(dá)和mRNA的相對表達(dá)量按臨床分期和組織分化進行不同的統(tǒng)計學(xué)分析，分化為G1的陽性率明顯高于分化為G3級的，差異具有顯著性(P＜0.05)。分化為G1級與分化為G2級比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。分化G2級與分化G3級比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。46例上皮性卵巢癌患者中，Syndecan-1mRNA和蛋白在Ⅰ期+Ⅱ期中的陽性表

9、達(dá)率明顯高于Ⅲ+Ⅳ期內(nèi)的陽性表達(dá)率，二者間存在顯著性差異。Syndecan-1蛋白和mRNA的表達(dá)均和上皮性卵巢癌患者的腫瘤病理類型無關(guān)(P＞0.05)，而與臨床分期、和組織分化顯著相關(guān)。
　　 4.將46例上皮性卵巢癌中EMMPRIN蛋白的陽性表達(dá)和mRNA的相對表達(dá)量按組織學(xué)分級和臨床分期進行統(tǒng)計學(xué)分析，分化為G3級的陽性率明顯高于分化為G1級的，差異具有顯著性(P＜0.05)。分化為G1級與分化為G2級比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意

10、義。分化G2級與分化G3級比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。EMMPRINmRNA和蛋白在Ⅰ期+Ⅱ期中的陽性表達(dá)率明顯高于Ⅲ+Ⅳ期內(nèi)的陽性表達(dá)率，二者間存在顯著性差異(P＜0.05)。EMMPRIN蛋白和mRNA的表達(dá)與上皮性卵巢癌的臨床分期和組織分化密切相關(guān)，而與腫瘤病理類型無相關(guān)性(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.Syndecan-1蛋白和mRNA在卵巢良性腫瘤和交界性腫瘤中的陽性表達(dá)率和表達(dá)量明顯高于其在上皮性卵巢

11、癌中的表達(dá)，隨著腫瘤惡性程度的增加，其陽性表達(dá)率和表達(dá)量下降，其表達(dá)下調(diào)可能在卵巢上皮性腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。而EMMPRIN蛋白和mRNA在良性腫瘤中的表達(dá)明顯低于其在交界性卵巢腫瘤和上皮性卵巢癌中的表達(dá)，隨著腫瘤惡性程度的增加，其陽性表達(dá)率和mRNA的表達(dá)量逐漸增高，提示其表達(dá)升高可能促進了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。
　　 2.Syndecan-1蛋白和mRNA在高分化和中分化的上皮性卵巢癌中的mRNA表達(dá)量和蛋白的陽性率高

12、于其在低分化卵巢癌中的表達(dá)，隨著臨床期別的升高，Syndecan-1蛋白的陽性表達(dá)率和mRNA的表達(dá)量下降。而EMMPRINmRNA和蛋白在高分化和中分化的上皮性卵巢癌中的表達(dá)低于其在低分化卵巢癌中的表達(dá)，隨著臨床期別的升高，EMMPRIN的表達(dá)明顯升高。Syndecan-1mRNA、蛋白和EMMPRINmRNA、蛋白在上皮性卵巢癌內(nèi)的表達(dá)與腫瘤的病理類型無關(guān)。
　　 3.Syndecan-1mRNA、蛋白和EMMPRINmRN