卵巢上皮性腫瘤中缺氧誘導因子-1α的表達及意義.pdf

1、研究背景： 在腫瘤發(fā)生過程中，其增生速度超過血管生成的速度而造成局部缺氧，腫瘤細胞適應缺氧環(huán)境所采取的策略是提高糖酵解速率和形成多血管體系。缺氧誘導因子1(hypoxia-induciblefactor-1，HIF-1)是缺氧狀態(tài)下廣泛存在于哺乳動物和人體細胞內的一種轉錄因子，其HIF-1α亞單位是惟一的氧調節(jié)亞單位，它決定HIF-1的活性。HIF-1的靶基因涉及腫瘤細胞能量代謝、血管生成、腫瘤轉移和離子代謝等，其在腫瘤病理中的

2、作用和地位日益引起重視。我們正是基于此檢測了HIF-1α在卵巢上皮性腫瘤中的表達，初步探討了其在腫瘤發(fā)展中的作用，為卵巢癌的診治提供新的思路和途徑。 第一部分卵巢上皮性腫瘤中缺氧誘導因子-1α的表達 目的： 探討卵巢上皮性腫瘤中缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)的表達及其與卵巢癌臨床病理特征的相互關系及臨床意義。 方法： 1.收集2000年至2004年西南醫(yī)院病理科卵巢上皮性腫瘤手術切除標本蠟塊共

3、計87例，其中卵巢上皮性癌44例(患者年齡22-66歲，平均49歲，≤50歲23例，＞50歲21例；漿液性囊腺癌25例，粘液性囊腺癌6例，子宮內膜樣癌7例，透明細胞癌2例，未明確型腺癌4例；高分化9例，中分化18例，低分化17例；臨床Ⅰ期9例，Ⅱ期1例，Ⅲ期30例，Ⅳ期4例；有淋巴結轉移17例，無淋巴結轉移27例)；卵巢上皮性交界性腫瘤11例(交界性漿液性囊腺瘤7例，交界性粘液性囊腺瘤4例)；卵巢上皮性良性腫瘤32例(漿液性囊腺瘤18例

4、，粘液性囊腺瘤14例)。 2.應用免疫組織化學技術(EnVisionTM+二步染色法)檢測了上述標本中HIF-1α蛋白表達水平，以磷酸鹽緩沖液代替一抗染色作為陰性對照。光鏡觀察結果并確定蛋白的表達情況。 3.分析HIF-1α在卵巢上皮性良性腫瘤、交界性腫瘤和卵巢癌組織的表達情況，并結合臨床病理資料分析了HIF-1α與卵巢癌臨床分期、淋巴結轉移、組織類型、病理分級等臨床病理特征間的關系。 結果： 1.在卵巢

5、上皮性良性腫瘤中HIF-1α陰性表達，而交界性及惡性腫瘤組織中都有HIF-1α表達，有顯著差異(均為P＜0.05)。HIF-1α在卵巢上皮性癌組織中陽性表達率為63.64％(28/44)，表達強度多為+和++級陽性表達，少數(shù)為+++級表達；在卵巢上皮性交界性腫瘤組織中陽性表達率為54.55％(6/11)，表達強度多為+級陽性表達，無+++級表達；但二者無顯著性差異(P＞0.05)。 2.HIF-1α蛋白的表達在卵巢癌各個病理分級

6、、組織類型、患者年齡間比較，差異均無顯著性(P＞0.05)，而臨床分期間有顯著性差異(P＜0.05)，其表達強度隨臨床分期的增高而加強。有淋巴結轉移組HIF-1α陽性表達明顯高于無淋巴結轉移組，二者有顯著性差異(P＜0.05)。 結論： HIF-1α在卵巢上皮性癌中呈高表達，并與臨床分期、淋巴結轉移有明顯關系，提示HIF-1α在卵巢癌的進展中可能起著重要作用。 第二部分缺氧誘導因子-1α與卵巢癌血管生成、細胞增殖

7、的關系 目的： 1.研究卵巢上皮性癌中HIF-1α、環(huán)氧化酶-2(COX-2)、CD34表達及其相關關系，探討HIF-1α與腫瘤血管生成關系及可能途徑； 2.研究卵巢上皮性癌中HIF-1α、增殖細胞核抗原(PCNA)表達及其相關關系，探討HIF-1α與腫瘤細胞增殖活性可能關系。 方法： 1.收集卵巢上皮性癌44例標本蠟塊(同第一部分)。 2.應用免疫組織化學技術(EnVisionTM+二步

8、染色法)檢測了上述標本中COX-2、CD34、PCNA蛋白表達水平，以磷酸鹽緩沖液代替一抗染色作為陰性對照。光鏡觀察結果并確定這三種蛋白的表達情況，計數(shù)微血管密度(MVD)。 3.結合臨床病理資料分析了COX-2、CD34和PCNA與腫瘤臨床分期、組織類型、病理分級等臨床病理特征間的關系。 4.分析HIF-1α、COX-2、CD34之間的關聯(lián)性，HIF-1α與PCNA之間的關聯(lián)性。 結果： 1.COX-2

9、主要在腫瘤細胞的胞質內表達。COX-2蛋白的表達在卵巢癌各個病理分級、組織類型間比較，差異均無顯著性(P＞0.05)；而臨床分期有顯著性差異(P＜0.05)，晚期患者的COX-2表達明顯高于早期患者。MVD在各個臨床分期、病理分級均有顯著性差異(P＜0.05)，隨臨床分期增加、細胞分化程度降低，MVD增加。與患者組織類型無關(P＞0.05)。HIF-1α表達與MVD有關聯(lián)性(r=0.574，P＜0.05)；COX-2表達與MVD有關聯(lián)性

10、(r=0.627，P＜0.05)；HIF-1α與COX-2表達亦有關聯(lián)性(r=0.666，P＜0.05)。 2.PCNA主要在腫瘤細胞的胞核內表達。PCNA指數(shù)在卵巢癌各個臨床分期、病理分級均有顯著性差異(P＜0.05)，與患者組織學類型無關(P＞0.05)。晚期患者的PCNA指數(shù)明顯高于早期患者；隨分化程度降低，PCNA指數(shù)增高。HIF-1α蛋白的表達與PCNA有關聯(lián)性(r=0.583，P＜0.05)，即PCNA指數(shù)隨著HIF

11、-1α表達程度增強而升高。 結論： 1.HIF-1α表達與COX-2、MVD有關聯(lián)性，提示HIF-1α過度表達與卵巢癌血管生成密切相關，HIF-1α可能與COX-2路徑一起調節(jié)卵巢癌血管生成，HIF-1α可能是卵巢癌抗血管生成的一個重要靶因子。 2.HIF-1α表達與PCNA有關聯(lián)性，提示HIF-1α可能與卵巢癌細胞增殖活性密切相關。 討論 缺氧誘導因子1(HIF-1)是哺乳動物和人體細胞內存在著

12、的一類介導缺氧適應性反應的轉錄因子。HIF-1α是惟一的氧調節(jié)亞單位，受缺氧調控并調節(jié)HIF-1的活性，此外某些抑癌基因的失活、癌基因的激活以及多種生長因子均與HIF-1的活性密切相關。由于腫瘤中缺氧環(huán)境及這些癌基因和抑癌基因的突變，HIF-1活化并與缺氧反應基因的缺氧反應元件上的HIF-1的結合位點相結合，從而誘導其下游的相關靶基因的表達，在腫瘤細胞適應缺氧、能量代謝、腫瘤血管生成及增殖、轉移過程中起重要作用。 近年來，許多學

13、者發(fā)現(xiàn)多種腫瘤組織中HIF-1α呈陽性表達。我們實驗結果顯示：卵巢上皮良性腫瘤、交界性腫瘤和惡性腫瘤的陽性表達率及表達強度呈上升趨勢，且HIF-1α表達與卵巢癌的臨床分期、淋巴結轉移呈正相關，說明HIF-1α表達在卵巢癌形成的早期階段，并隨著腫瘤的進展而增高。HIF-1α在卵巢腫瘤由良性向惡性轉化及腫瘤轉移過程中可能起著某種重要作用。 活躍的血管生成是包括卵巢癌在內的許多實體腫瘤生長和轉移過程中普遍存在的病理現(xiàn)象。本研究顯示：卵

14、巢癌組織內HIF-1α蛋白的表達與腫瘤內MVD計數(shù)有關聯(lián)性，提示HIF-1α在促進卵巢癌微血管形成中可能起一定作用。已知COX-2有促進血管生成的作用，我們實驗亦證實卵巢癌組織中HIF-1α與COX-2有關聯(lián)性，說明HIF-1α可能與COX-2路徑一起調節(jié)卵巢癌血管生成，是對HIF-1α通過VEGF依賴途徑調節(jié)腫瘤血管生成的有意補充。 腫瘤細胞最根本的生物學特征是無限制的增殖，其增殖活性與腫瘤的生物學行為，特別是腫瘤的浸潤、轉移