荷葉生物堿的提取及干預(yù)小鼠非酒精性脂肪肝的研究.pdf

1、目的：研究荷葉生物堿提取的工藝；利用復(fù)合高脂飲食和低濃度四氯化碳腹腔注射誘導(dǎo)非酒精性脂肪肝小鼠模型；研究荷葉生物堿對小鼠非酒精性脂肪肝的干預(yù)作用。
　　方法：
　　（1）提取荷葉生物堿的工藝：利用正交試驗方法，研究 pH值、提取溫度、提取時間、固液比等條件對荷葉生物堿提取的影響。
　?。?）動物模型建立預(yù)實驗：84只昆明小鼠隨機(jī)分為3組：對照組，高脂模型組，高脂模型+CCl4組。觀察飼養(yǎng)第2、4、6、8周末肝臟形態(tài)和病

2、理變化以及測定第8周末血清ALT、AST、TC、TG，以及肝臟TC和TG。
　?。?）以正常方法飼養(yǎng)8周的12只小鼠為對照組，將36只高脂模型+ CCl4飼養(yǎng)8周的小鼠分為模型組，易善復(fù)組和荷葉生物堿組，每組12只。易善復(fù)組灌胃，易善復(fù)（多烯磷脂酰膽堿膠囊）150mg/kg體重，實驗第2周末開始，1次/天，共6周；荷葉生物堿組灌胃，荷葉生物堿100mg/kg，0.25ml/次，實驗第2周末開始，1次/天，共6周。實驗結(jié)束時，測定肝

3、指數(shù)，肝組織TG、TC，肝組織切片制備及病理評分。
　　結(jié)果：
　?。?）影響荷葉生物堿提取效果各因素的主次順序為：提取溫度=pH＞提取時間＞固液比。得到最優(yōu)化的提取條件為：pH值為2.5，提取溫度為90℃，提取時間為2h，固液比為1：15。以該條件提取的荷葉生物堿的純度為73.4％。
　　（2）動物模型建立預(yù)實驗：復(fù)合高脂飲食+5%CCl4腹腔注射的方式造模，第2周末開始出現(xiàn)炎癥細(xì)胞浸潤，第4周末出現(xiàn)少量脂滴，第6周

4、末出現(xiàn)脂肪病變，第8周末在脂肪病變的基礎(chǔ)上，部分小鼠出現(xiàn)了肝纖維化，8周末小鼠肝指數(shù)、血清TC、TG、ALT、AST，肝臟TC、TG含量明顯升高。
　　（3）荷葉生物堿對小鼠非酒精性脂肪肝的干預(yù)作用：干預(yù)42d后，荷葉生物堿組的肝指數(shù)、血清TC、TG、ALT、AST，肝臟TC、TG含量明顯降低。光鏡觀察結(jié)果表明，干預(yù)后肝組織脂質(zhì)變性及肝纖維化程度改變明顯減輕。
　　結(jié)論：
　　1、提取荷葉生物堿的最佳條件：溫度為90℃