適配子型壓電石英晶體傳感器的構(gòu)建及其與抗體型壓電免疫傳感器的比較研究.pdf

1、目的： 通過建立壓電石英晶體振蕩頻率檢測平臺，利用適配子作為壓電生物傳感器的生物識別分子，構(gòu)建適配子型壓電石英晶體生物傳感器，并用其對人免疫球蛋白E進行檢測，對各項檢測參數(shù)進行研究，并與抗體型壓電免疫生物傳感器進行比較。 方法： 1.利用精細(xì)微加工工藝制作的石英晶體作為換能器，并在此基礎(chǔ)上制備生物傳感器微陣列，以構(gòu)建壓電石英晶體生物傳感器檢測平臺。 2.采用生物素-親和素法將抗人免疫球蛋白適配子固定于石英

2、晶體表面，用于人免疫球蛋白E的標(biāo)準(zhǔn)血清及臨床標(biāo)本的檢測。根據(jù)頻率變化和IgE濃度之間的關(guān)系繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 3.探索適配子型壓電生物傳感器進行實際檢測的準(zhǔn)確性、最低檢測限等檢測參數(shù)，并對其非特異結(jié)合反應(yīng)、再生條件、保存時間等進行研究。 4.分別用適配子型壓電生物傳感器和抗體型壓電免疫傳感器對IgE標(biāo)準(zhǔn)品和血清標(biāo)本進行檢測，并對兩者的檢測范圍、最低檢測限、檢測時間、非特異性結(jié)合實驗、再生實驗、保存實驗等進行研究，以比較適配子

3、型壓電生物傳感器和抗體型壓電免疫傳感器進行實際檢測的優(yōu)越性。 結(jié)果： 1.所構(gòu)建的適配子型壓電生物傳感器的檢測范圍為2.5-200μg/L，最低檢測值為3ug/L，與化學(xué)發(fā)光法相比相關(guān)系數(shù)為0.992，具有良好的檢測性能。 2.適配子型壓電生物傳感器對BSA、HSA、IgG、IgM等干擾蛋白的檢測信號顯著低于特異性IgE的檢測信號(＜5％)。 3.在選用的再生試劑中，EDTA表現(xiàn)了最好的再生效果，適配子芯

4、片經(jīng)過10次再生后仍可保留80％的生物學(xué)活性。 4.對適配子芯片進行保存實驗，在7天內(nèi)穩(wěn)定性幾乎沒有改變，隨后穩(wěn)定性逐漸下降，3周后檢測活性約為初始檢測的90％。 5.適配子型壓電生物傳感器和抗體型免疫傳感器均可在15min內(nèi)完成檢測，都具有良好的檢測靈敏度、線性范圍和特異性，準(zhǔn)確性與化學(xué)發(fā)光法相當(dāng)，對結(jié)果進行回歸分析吻合性較好。 6.適配子型生物傳感器的再生和保存性能優(yōu)于抗體型免疫傳感器。 結(jié)論：

5、 1.所構(gòu)建的適配子型壓電生物傳感器和化學(xué)發(fā)光法進行人血清標(biāo)本IgE檢測的相關(guān)系數(shù)為0.992。適配子型壓電生物傳感器可以對復(fù)雜生物樣本中的IgE進行高靈敏度、高特異性的檢測。 2.適配子型壓電生物傳感器和抗體型免疫傳感器均可在15分鐘內(nèi)完成對IgE的檢測，可為患者提供更快速的診斷，同時操作更加簡便。與傳統(tǒng)的檢測方法相比，傳感器方法具有無需標(biāo)記，無需對標(biāo)本進行預(yù)處理的特點。 3.適配子型壓電生物傳感器在最低檢測限、結(jié)合