固定化超氧化物歧化酶的制備與性質(zhì)研究.pdf

1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文固定化超氧化物歧化酶的制備與性質(zhì)研究姓名：李磊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：藥物分析學(xué)指導(dǎo)教師：馬長(zhǎng)清20080515華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文1固定化超氧化物歧化酶的制備與性質(zhì)研究固定化超氧化物歧化酶的制備與性質(zhì)研究研究生:李磊導(dǎo)師:馬長(zhǎng)清教授中文摘要中文摘要固定化酶作為現(xiàn)代生物工程技術(shù)的重要組成部分之一，在醫(yī)學(xué)、分析與分離技術(shù)以及化學(xué)合成等領(lǐng)域有著廣泛的用途。超氧化物歧化酶（superoxid

2、edismutase.簡(jiǎn)稱SOD）是美國(guó)科學(xué)家Mccd和Fridovich1969年從牛血紅細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的一種含有金屬離子的酶，也是至今為止發(fā)現(xiàn)的唯一的以自由基為底物的酶。該酶能專一的清除生物氧化過(guò)程中產(chǎn)生的超氧陰離子自由基（O2.ˉ.ˉ），在維護(hù)生物機(jī)體內(nèi)自由基產(chǎn)生與清除的動(dòng)態(tài)平衡過(guò)程中起著極其重要的作用。本課題制備了固定化超氧化物歧化酶，測(cè)定了固定化酶的活力，并對(duì)其理化性質(zhì)進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。一、固定化超氧化物歧化酶的制備及活力測(cè)定一、

3、固定化超氧化物歧化酶的制備及活力測(cè)定本課題通過(guò)對(duì)甲殼素的去乙?；苽洳⒓兓瘹ぞ厶牵瑢ぞ厶桥c一定濃度的戊二醛混合交聯(lián)，使其發(fā)生氨醛縮合生成活化的載體，將超氧化物歧化酶與活化的載體混合攪拌后抽濾并洗滌，放置于4℃冰箱保存待用。以改進(jìn)的鄰苯三酚自氧化法為測(cè)定酶活力的方法。固定化超氧化物歧化酶活性可達(dá)到333U.g1酶活回收率為86.32%二、酶活力測(cè)定的兩種方法比較二、酶活力測(cè)定的兩種方法比較測(cè)定超氧化物歧化酶的活力，常采用經(jīng)典的鄰苯三酚自