VibsaninB（莢蒾乙素）靶向HSP90β抑制炎性細(xì)胞遷移及在EAE治療中的應(yīng)用.pdf

1、目的：
　　炎癥相關(guān)疾病是當(dāng)前人類健康的一大威脅。間質(zhì)性炎性細(xì)胞遷移在炎癥發(fā)生過程中起重要作用，該過程本身可作為治療炎癥相關(guān)疾病如多發(fā)性硬化性的藥物靶標(biāo)，鑒定能抑制異常白細(xì)胞遷移的小分子化合物對治療這類炎癥相關(guān)疾病具有重要意義。在藥物研究史上，有相當(dāng)大一部分藥物來源于天然產(chǎn)物或其衍生物。因此，天然產(chǎn)物作為自然存在的化學(xué)結(jié)構(gòu)，在藥物研究與開發(fā)中有著非常重要的地位。本研究的目的是：從來源于植物的小分子化合物庫中篩選具有抑制炎性細(xì)胞遷移

2、的天然產(chǎn)物，并闡明該天然產(chǎn)物的作用機制及評價其在炎癥相關(guān)疾病如多發(fā)性硬化治療中的應(yīng)用價值。
　　方法：
　　在本研究中，我們采用如下研究方法：
　　1.利用熒光顯微鏡，活體水平下觀察轉(zhuǎn)基因斑馬魚系Tg：zlyz-EGFP胚胎（3dpf）炎性細(xì)胞向急性損傷處的遷移行為，并以此作為實驗體系進行活性天然產(chǎn)物的篩選；
　　2.利用基于活性的蛋白譜親和純化技術(shù)，“釣出”具有生物活性的天然產(chǎn)物直接靶標(biāo)，然后利用基因敲減及分子

3、生物學(xué)等技術(shù)，從功能水平證明該靶標(biāo)與天然產(chǎn)物生物活性之間的關(guān)系，并闡明該天然產(chǎn)物發(fā)揮作用的分子機制；
　　3.利用多發(fā)性硬化的動物模型實驗性自身免疫性腦炎（EAE），評價天然產(chǎn)物對炎癥相關(guān)疾病的臨床治療價值。
　　結(jié)果：
　　在本研究中，我們得到如下結(jié)果：
　　1.我們篩選得到天然產(chǎn)物Vibsanin B（莢蒾乙素），其能顯著抑制斑馬魚炎性細(xì)胞遷移，并能抑制人THP-1細(xì)胞的趨化能力；
　　2.Vibsan

4、in B直接靶向HSP90β的C末端，并能體外抑制HSP90β的分子伴侶功能；此外，HSP90β功能抑制能阻斷炎性細(xì)胞的遷移，該現(xiàn)象與Vibsanin B抑制炎性細(xì)胞遷移的生物活性一致；
　　3.Vibsanin B能降低小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)中炎性細(xì)胞的浸潤，并能緩解小鼠 EAE的發(fā)病嚴(yán)重程度。
　　結(jié)論：
　　Vibsanin B是一結(jié)構(gòu)新穎的HSP90β亞型特異性的抑制劑，其能抑制炎性細(xì)胞的遷移，作為一個先導(dǎo)化合物，為