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文檔簡介
1、目的:
探討特異性熱休克蛋白90(Heat Shock Protein90,HSP90)抑制劑鹽酸瑞它霉素(Retaspimycin Hydrochloride,IPI-504)對人胃癌細胞SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干細胞樣細胞的增殖、遷移、侵襲及凋亡等影響及機制。
材料與方法:
應(yīng)用流式細胞儀檢測及分選SGC-7901、NCI-N87中干細胞樣細胞;應(yīng)用MTT比色法檢測不同濃度IPI-
2、504對SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干細胞樣細胞的生長抑制率;應(yīng)用平板克隆形成實驗檢測不同濃度IPI-504對SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干細胞樣細胞的克隆形成能力;應(yīng)用劃痕實驗及 Transwell侵襲實驗檢測 IPI-504對SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干細胞樣細胞遷移及侵襲力;應(yīng)用流式細胞儀檢測IPI-504對SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干細胞樣細胞凋亡率的影
3、響;應(yīng)用qRT-PCR及Western Blot技術(shù)檢測IPI-504對SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干細胞樣細胞的中的EGFR及HER-2 mRNA及蛋白表達的影響。
結(jié)果:
(1)從人胃癌細胞系SGC-7901、NCI-N87分選出8%和6%的CD44+干細胞樣細胞,陽性率>95%。
(2) IPI-504能顯著抑制SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干細胞樣細胞增殖、克隆形成
4、、遷移、侵襲能力,并且增加以上細胞的凋亡率,且呈劑量依賴性。
(3) IPI-504能顯著抑制SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干細胞樣細胞中HSP90的表達,呈劑量依賴性;此外,IPI-504能顯著抑制SGC-7901、NCI-N87及其CD44+干細胞樣細胞中EGFR及HER-2 mRNA及蛋白表達。
結(jié)論:
IPI-504通過抑制人胃癌細胞 SGC-7901、NCI-N87及其 CD44+
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