Hsp90抑制劑對前列腺癌PC-3M細(xì)胞AR和TNF-α介導(dǎo)的信號通路影響及其意義.pdf

1、第一部分Hsp90抑制劑格爾德霉素對PC-3M細(xì)胞中AR表達(dá)的影響 目的：探討熱休克蛋白90抑制劑格爾德霉素(Geldanamycin，GA)對前列腺腫瘤PC-3M細(xì)胞中雄激素受體ARmRNA表達(dá)的影響及意義。 方法：常規(guī)法培養(yǎng)PC-3M細(xì)胞系，實(shí)驗(yàn)分為四組即對照組、6h組、12h組和24h組后用GA(1μg/ml)處理PC-3M細(xì)胞，采用RT-PCR測雄激素受體ARmRNA水平的表達(dá)差異。 結(jié)果：使用熱休克蛋白

2、90抑制劑GA處理12h后，能明顯抑制ARmRNA表達(dá)。 結(jié)論：熱休克蛋白90抑制劑能有效抑制前列腺癌細(xì)胞系PC-3M細(xì)胞中雄激素受體ARmRNA的表達(dá)。 第二部分格爾德霉素對腫瘤壞死因子誘導(dǎo)的PC-3M細(xì)胞中c-FLIP表達(dá)上調(diào)的影響 目的：探討熱休克蛋白90抑制劑格爾德霉素(Geldanamycin，GA)對TNF-α誘導(dǎo)的前列腺腫瘤PC-3M細(xì)胞中白介素-1β轉(zhuǎn)換酶抑制蛋白(c-FLIP)上調(diào)的影響及意義。

3、 方法：常規(guī)法培養(yǎng)PC-3M細(xì)胞系，試驗(yàn)分為對照組、TNF-α、和GA+TNF-α組。分別用TNF-α和GA+TNF-α處理PC-3M細(xì)胞，用免疫細(xì)胞化學(xué)法測c-FLIP蛋白水平表達(dá)差異，采用RT-PCR測c-FLIPmRNA水平的表達(dá)差異。 結(jié)果：使用TNF-α處理6小時后PC-3M細(xì)胞c-FLIP在蛋白及mRNA水平表達(dá)明顯上調(diào)，而使用熱休克蛋白90抑制劑GA預(yù)處理18小時后，能明顯抑制TNF-α誘導(dǎo)的c-FLIP表