E2F陷阱DNA對(duì)前列腺癌PC-3M細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo).pdf

1、原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中己經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的科研成果。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。論文作者簽名::Zl奮日期:護(hù)卿、兮_了關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解山東大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子

2、版，允許論文被查閱和借閱本人授權(quán)山東大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名:q4導(dǎo)師簽名:體日期:2tSF山東大學(xué)碩士學(xué)位論文的基礎(chǔ)上，應(yīng)用RTPCRWesternblot技術(shù)進(jìn)一步研究E2FdecoyDNA對(duì)某些癌基因如CmycCyclinD1表達(dá)的影響。首先，人工合成雙鏈硫代E2FdecoyDNAAREdeco

3、yDNA和ControldecoyDNA，然后，通過(guò)脂質(zhì)體把E2FdecoyDNA轉(zhuǎn)染入PC3M細(xì)胞，并以AREdecoyDNAControldecoyDNA作對(duì)照在用倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化、MTT法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后的細(xì)胞生長(zhǎng)情況的基礎(chǔ)上，用DNA凝膠電泳、流式細(xì)胞術(shù)(FCM)、等定性定量的方法研究細(xì)胞DNA的降解規(guī)律同時(shí)用FCM觀察細(xì)胞周期分布及凋亡率用RTPCR檢測(cè)CmycmRNA及CyclinDlmRNA表達(dá)、Westernb

4、lot檢測(cè)Cmy。蛋白和CyclinDl蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果顯示:E2FdecoyDNA轉(zhuǎn)染PC3M細(xì)胞48小時(shí)，其細(xì)胞形態(tài)改變符合凋亡的典型改變，MTT法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況表明轉(zhuǎn)染后48小時(shí)生長(zhǎng)抑制最明顯，轉(zhuǎn)染后的DNA凝膠電泳出現(xiàn)典型的梯形條帶(DNAladder).FCM檢測(cè)發(fā)現(xiàn)PC3M細(xì)胞凋亡率26.35%aRTPCRWesternblot發(fā)現(xiàn)E2FdecoyDNA能抑制Cmyc、CyclinDl癌基因的表達(dá)。而AREdecoyD

5、NA.ControldecoyDNA并不能誘導(dǎo)PC3M細(xì)胞凋亡不能抑制Cmyc癌基因和CyclinDl癌基因的表達(dá)。上述結(jié)果表明:E2FdecoyDNA能誘導(dǎo)雄激素非依賴性的前列腺癌細(xì)胞(PC3M細(xì)胞)凋亡。E2FdecoyDNA可以抑制Cmyc癌基因和CyclinDl基因的表達(dá)。這些表明，E2FdecoyDNA誘導(dǎo)PC3M細(xì)胞凋亡亙直旦是通過(guò)多個(gè)環(huán)節(jié)，多個(gè)步驟來(lái)實(shí)現(xiàn)的，其詳細(xì)機(jī)制還有待于進(jìn)一步研究?？傊緦?shí)驗(yàn)的研究結(jié)果表明E2Fde