E2F1在胃癌中的表達及E2F decoy DNA對胃癌SGC7901細胞凋亡的誘導.pdf

1、目的:(1)探討轉錄因子E2F1基因的表達與胃癌生物學行為及與生存素（survivin）和p53表達的相關性。
　　 (2)利用E2F decoy DNA抑制胃癌SGC7901細胞增殖，誘導其凋亡。
　　 方法:
　　 (1)應用免疫組織化學SP法檢測61例胃癌組織中E2F1、Survivin和P53的表達，并以20例胃低級別上皮內瘤變?yōu)閷φ铡?br>　　 (2)用脂質體LipofectaminTM2000將人

2、工合成E2F decoy DNA轉入胃癌SGC7901細胞，倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化，MTT法檢測細胞的存活率，流式細胞儀檢測細胞的凋亡率。
　　 結果:
　　 (1)E2F1、Survivin和P53在胃癌組織中的陽性率分別為75.4%、85.2%和68.9%，顯著高于低級別上皮內瘤變組織中的30.0%、40.0%和15.0%，差異有顯著性（p<0.05）。
　　 (2)E2F1的表達在胃癌分化程度、浸潤

3、深度、TNM分期、有無淋巴結轉移及遠處轉移中差異無顯著性（p>0.05）。Survivin和P53的表達在胃癌TNM分期和有無遠處轉移中均有顯著性差異（p<0.05），并且Survivin的表達在胃癌有無淋巴結轉移間差異有顯著性（p<0.05）。
　　 (3)胃癌中E2F1的表達強度分別與Survivin和P53的表達強度呈等級正相關（rs1=0.519,p1<0.01；rs2=0.602，p2<0.01）。
　　 (4

4、)胃癌SGC7901細胞轉染E2Fdecoy DNA后，分時段觀察細胞形態(tài)，發(fā)現(xiàn)細胞形態(tài)逐漸縮小，胞漿出現(xiàn)空泡，核膜逐漸皺縮，約在48小時可見凋亡小體。
　　 (5)MTT法檢測細胞存活率發(fā)現(xiàn)，E2F decoy DNA組SGC7901細胞存活率低，與Control decoy DNA組和空白對照組相比有顯著差異(p<0.05)，Control decoy DNA組和空白對照組的細胞存活率無顯著差異(p>0.05)，E2F de

5、coy DNA組細胞轉染后24h存活率為65.3％，轉染后48h存活率為48.3％，轉染后72h存活率為48.5%。
　　 (6)流式細胞術（FCM）觀察細胞凋亡率，轉染E2F decoy DNA后的SGC7901細胞24小時凋亡率為14.75±2.26%、死亡細胞率2.43±0.30%，48小時細胞凋亡率為22.15±3.29%、死亡細胞率20.58±3.47%，與空白對照組和Control decoy DNA組相比差異有顯著

6、性(p<0.05)。
　　 結論:
　　 (1)E2F1可能作用于胃癌發(fā)生的早期階段，Survivin和P53可能作用于胃癌發(fā)生的晚期階段。
　　 (2)E2F1、Survivin和P53在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中可能起協(xié)同作用。
　　 (3)轉錄因子E2Fdecoy DNA轉染后，能成功誘導胃癌SGC7901細胞凋亡。
　　 (4)轉錄因子decoy策略，通過基因功能缺失，有可能為胃癌的基因治療開辟新