E2F1及EGR-1在腎透明細胞癌中的表達及意義.pdf

1、目的:腎細胞癌(renal cell carcinoma，RCC)在成人惡性腫瘤中大約占2％～3％，其中腎透明細胞癌(renal clear cell carcinoma，RCCC)是腎細胞癌中最常見的惡性腫瘤。25％病人就診時已轉(zhuǎn)移，并且轉(zhuǎn)移性腎癌病人對放化療均不敏感，即使是免疫治療和分子靶向治療有效率也較低。細胞周期調(diào)節(jié)失控是腫瘤發(fā)生發(fā)展重要原因之一，同時細胞周期的調(diào)控需要多種轉(zhuǎn)錄因子相互作用共同完成。轉(zhuǎn)錄因子E2F1、早期生長反應(yīng)

2、基因-1（early growth response gene-1，EGR-1）與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，但二者在腎透明細胞癌中的表達情況尚未報道。本文旨在觀察E2F1、EGR-1在腎透明細胞癌組和對照組中的表達情況，分析二者表達與腎透明細胞癌臨床分期、病理分級、性別和年齡之間的關(guān)系，探討二者在腎透明細胞癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。
　　方法:
　　1、選取2013年4月至2014年5月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院泌尿外科

3、手術(shù)病人的腎透明細胞癌組織標(biāo)本48例（經(jīng)病理學(xué)證實），同時選取28例癌旁正常腎組織（為癌旁4cm以外腎組織，經(jīng)病理學(xué)證實）作為對照組。手術(shù)前所有患者均未行放療、化療、細胞因子及分子靶向等治療。所有標(biāo)本分為兩份，一份經(jīng)10％的中性緩沖甲醛溶液固定，石蠟包埋，4μm厚連續(xù)切片;另一份置于-80℃冰箱中保存。
　　2、應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測E2F1、EGR-1蛋白在腎透明細胞癌組和對照組中的表達情況。應(yīng)用RT-PCR方法檢測E2F1、E

4、GR-1在腎透明細胞癌組和對照組中mRNA的表達情況，采用兩者mRNA的積分吸光度比值表示結(jié)果。
　　3、記錄48例腎透明細胞癌患者的年齡、性別、臨床分期及病理分級情況。應(yīng)用免疫組織化學(xué)法分別檢測E2F1、EGR-1在48例腎透明細胞癌組織中的表達情況，分析二者與患者的年齡、性別、臨床分期及病理分級的關(guān)系，分析E2F1、EGR-1在48例腎透明細胞癌組織中表達的相關(guān)關(guān)系。
　　4、應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)。分析E

5、2F1、EGR-1在腎透明細胞癌組和對照組中陽性表達率之間的差異，在腎透明細胞癌組中比較二者與患者臨床病理特征的關(guān)系，應(yīng)用，檢驗或Fisher確切概率法檢驗;在腎透明細胞癌組中，E2F1與EGR-1表達的相關(guān)關(guān)系采用Spearman等級相關(guān)分析;E2F1、EGR-1的mRNA積分吸光度值以(x)±s表示，采用t檢驗進行組間比較。P＜0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、免疫組織化學(xué)法顯示:E2F1蛋白表達主要分布于

6、細胞核中，在腎透明細胞癌組中陽性表達率為75％(36/48)，明顯高于對照組32.1％(9/28)（P＜0.05）。EGR-1蛋白表達也主要分布于細胞核中，在腎透明細胞癌組中陽性表達率為79.2％(38/48)明顯高于對照組35.7％(10/28)(P＜0.05)。RT-PCR結(jié)果顯示:E2F1在對照組及腎透明細胞癌組中的積分吸光度值分別為0.1225±0.0237、0.2628±0.0656，腎透明細胞癌組明顯高于對照組(P＜0.05

7、); EGR-1在對照組及腎透明細胞癌組中的積分吸光度值分別為0.1279±0.0266、0.2788±0.0893，腎透明細胞癌組明顯高于對照組(P＜0.05)。
　　2、在48例腎透明細胞癌組中，男性31例，女性17例，年齡45-76歲。根據(jù)1997年Fuhrman分級進行病理組織分級，其中高分化10例，中分化19例，低分化19例;根據(jù)國際2010年AJCC腎癌TNM分期標(biāo)準進行臨床分期:Ⅰ期10例、Ⅱ期18例、Ⅲ期16例和Ⅳ

8、期4例。E2F1、EGR-1在腎透明細胞癌組的表達具有正相關(guān)性(r=0.533，P＜0.01)。其中，E2F1在腎透明細胞癌組織中的表達，在Ⅲ-Ⅳ期組明顯高于在Ⅰ-Ⅱ期組中的表達(x2=7.314，P＜0.01)，在低分化組明顯高于在中、高分化組中的表達(x2=6.534，P＜0.05)。EGR-1在腎透明細胞癌組織中的表達，在Ⅲ-Ⅳ期組明顯高于在Ⅰ-Ⅱ期組中的表達(x2=5.211，P＜0.05)，在低分化組明顯高于在中、高分化組中的

9、表達(x2=8.276，P＜0.01)。然而，E2F1、EGR-1在48例腎透明細胞癌組織中的表達與患者性別、年齡無關(guān)(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、E2F1、EGR-1在腎透明細胞癌組中的表達均高于在對照組中的表達。
　　2、E2F1、EGR-1蛋白在腎透明細胞癌組織中的表達與患者腫瘤的臨床分期及病理分級有關(guān)，而與患者的性別、年齡無關(guān)。
　　3、E2F1、EGR-1蛋白在腎透明細胞癌組織中的表達具有正相