LncRNA TUG1在腎透明細(xì)胞癌中表達(dá)及臨床意義的研究.pdf

1、目的：影響腎透明細(xì)胞癌治療及預(yù)后的主要因素是腫瘤的轉(zhuǎn)移，而目前對腎癌的轉(zhuǎn)移機(jī)制尚不明確。LncRNA TUG1（牛磺酸調(diào)節(jié)基因1）是一個表達(dá)在視網(wǎng)膜和大腦的長鏈非編碼RNA。最新研究顯示LncRNA TUG1在膀胱癌、胃癌、直腸癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、骨肉瘤等腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。本實驗研究具體探討LncRNA TUG1在腎透明細(xì)胞癌（ccRCC）及癌旁正常組織中的表達(dá)水平，分析LncRNA TUG1在ccRCC中的表達(dá)水平與臨床病理特

2、質(zhì)及預(yù)后的相關(guān)聯(lián)系，并深入探討其在ccRCC發(fā)病進(jìn)展中所起的作用機(jī)制，為ccRCC的早期無創(chuàng)診斷、精準(zhǔn)醫(yī)療及隨訪預(yù)測提供研究基礎(chǔ)。
　　方法：深圳市第二人民醫(yī)院生物樣本庫中隨機(jī)抽取40例ccRCC及配對的距腫瘤組織2cm之外的正常腎組織。提取實驗樣本總RNA并通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA，利用實時熒光定量PCR（RT-PCR）檢測LncRNA TUG1在組織樣本、四株腎癌細(xì)胞系及腎小管正常上皮細(xì)胞HK-2中的表達(dá)量，利用統(tǒng)計學(xué)分析Lnc

3、RNA TUG1表達(dá)量與臨床病理特征之間的聯(lián)系。利用RT-PCR技術(shù)檢測A704、A498、786-0和ACHN四種不同轉(zhuǎn)移潛能腎癌細(xì)胞系中LncRNA TUG1的表達(dá)水平。挑選出高表達(dá)的兩株腎癌細(xì)胞系A(chǔ)704、A498。通過構(gòu)建siRNA載體，研究干涉沉默LncRNA TUG1對腎癌細(xì)胞系A(chǔ)704、A498的生長、凋亡、侵襲及遷移等生物學(xué)行為的影響，通過CCK-8細(xì)胞增殖-毒性檢測試劑盒來檢測細(xì)胞生長情況，再用劃痕實驗檢測細(xì)胞遷移能力

4、， Transwell實驗來檢測細(xì)胞侵襲能力，為腎癌的早期診斷和精準(zhǔn)治療提供新的方法和思路。
　　結(jié)果：
　　(1)40對腎透明細(xì)胞癌樣本中31例（77.5％）LncRNA TUG1表達(dá)上調(diào)，ccRCC組織中LncRNA TUG1表達(dá)水平顯著高于配對癌旁組織（P<0.01）；
　　(2) LncRNA TUG1表達(dá)水平與患者的性別（P=0.694）、年齡（P=0.457）、腫瘤分期（P=1.000）、AJCC分期（P=

5、0.453）及遠(yuǎn)處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P=1.000）無明顯相關(guān)性。而LncRNA TUG1表達(dá)水平與患者腫瘤大?。≒=0.003<0.05）及福爾曼分級（P=0.001<0.05）有顯著相關(guān)性；
　　(3)通過體外干擾沉默LncRNA TUG1后，腎癌細(xì)胞系A(chǔ)704、A498細(xì)胞增殖明顯降低，細(xì)胞侵襲能力明顯下降，細(xì)胞凋亡明顯增加。
　　結(jié)論：
　　(1)在ccRCC組織中，LncRNA TUG1的表達(dá)水平相比正常腎組織中明

6、顯上升，提示LncRNA TUG1表達(dá)升高可能與腎癌的發(fā)病、進(jìn)展相關(guān)，臨床上檢測LncRNA TUG1的表達(dá)量可能有利于ccRCC的早期診斷；
　　(2) LncRNA TUG1的表達(dá)水平與腫瘤大小、福爾曼分級相關(guān)，提示其可用來預(yù)測腫瘤的TNM分期及腫瘤惡性程度；
　　(3) LncRNA TUG1可能是腎癌發(fā)展發(fā)展中起重要作用的癌基因，通過抑制LncRNA TUG1的表達(dá)或許將成為腎癌精準(zhǔn)治療的新手段。
　　目的：提

7、高對睪丸惡性間質(zhì)細(xì)胞瘤（TMLCT）臨床病理特征的認(rèn)識及無創(chuàng)診斷水平方法:回顧分析1例TMLCT的臨床病理資料，檢測患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）并進(jìn)行文獻(xiàn)復(fù)習(xí)
　　結(jié)果:全麻下行根治性右睪丸腫瘤切除術(shù)。術(shù)后病理檢查顯示：睪丸惡性間質(zhì)細(xì)胞瘤，以間質(zhì)細(xì)胞為主，可疑脈管癌栓。免疫組化染色示：α-inhibin（+），vimentin部分（+），EMA（+），PLAP（+），CD30（+），Ki67約5%（+），CK（-）, CK7（

8、-），S100（-），CD10（-），SMA（-）,Des（-），AFP（-），HCG（-），CEA（-）CK19（-）,CD117（-）,Oct-4（-）,LCA（-）,CD20（-）,Pax-5（-）,CD3（-）,CD43（-）。患者外周血中共檢測到2個CTCs。術(shù)后復(fù)查因多發(fā)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移行化療3程，隨后復(fù)查CT見腹膜后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯縮小，予行腹膜后腫物切除+冷凍消融術(shù)。隨訪8個月復(fù)查CT見腹膜后轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)較前增大并腎上腺轉(zhuǎn)移