LncRNA TUG1在腎透明細胞癌中表達及臨床意義的研究.pdf

1、目的：影響腎透明細胞癌治療及預后的主要因素是腫瘤的轉移，而目前對腎癌的轉移機制尚不明確。LncRNA TUG1（?；撬嵴{節(jié)基因1）是一個表達在視網膜和大腦的長鏈非編碼RNA。最新研究顯示LncRNA TUG1在膀胱癌、胃癌、直腸癌、神經膠質瘤、骨肉瘤等腫瘤的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。本實驗研究具體探討LncRNA TUG1在腎透明細胞癌（ccRCC）及癌旁正常組織中的表達水平，分析LncRNA TUG1在ccRCC中的表達水平與臨床病理特

2、質及預后的相關聯(lián)系，并深入探討其在ccRCC發(fā)病進展中所起的作用機制，為ccRCC的早期無創(chuàng)診斷、精準醫(yī)療及隨訪預測提供研究基礎。
　　方法：深圳市第二人民醫(yī)院生物樣本庫中隨機抽取40例ccRCC及配對的距腫瘤組織2cm之外的正常腎組織。提取實驗樣本總RNA并通過逆轉錄獲得cDNA，利用實時熒光定量PCR（RT-PCR）檢測LncRNA TUG1在組織樣本、四株腎癌細胞系及腎小管正常上皮細胞HK-2中的表達量，利用統(tǒng)計學分析Lnc

3、RNA TUG1表達量與臨床病理特征之間的聯(lián)系。利用RT-PCR技術檢測A704、A498、786-0和ACHN四種不同轉移潛能腎癌細胞系中LncRNA TUG1的表達水平。挑選出高表達的兩株腎癌細胞系A704、A498。通過構建siRNA載體，研究干涉沉默LncRNA TUG1對腎癌細胞系A704、A498的生長、凋亡、侵襲及遷移等生物學行為的影響，通過CCK-8細胞增殖-毒性檢測試劑盒來檢測細胞生長情況，再用劃痕實驗檢測細胞遷移能力

4、， Transwell實驗來檢測細胞侵襲能力，為腎癌的早期診斷和精準治療提供新的方法和思路。
　　結果：
　　(1)40對腎透明細胞癌樣本中31例（77.5％）LncRNA TUG1表達上調，ccRCC組織中LncRNA TUG1表達水平顯著高于配對癌旁組織（P<0.01）；
　　(2) LncRNA TUG1表達水平與患者的性別（P=0.694）、年齡（P=0.457）、腫瘤分期（P=1.000）、AJCC分期（P=

5、0.453）及遠處淋巴結轉移（P=1.000）無明顯相關性。而LncRNA TUG1表達水平與患者腫瘤大小（P=0.003<0.05）及福爾曼分級（P=0.001<0.05）有顯著相關性；
　　(3)通過體外干擾沉默LncRNA TUG1后，腎癌細胞系A704、A498細胞增殖明顯降低，細胞侵襲能力明顯下降，細胞凋亡明顯增加。
　　結論：
　　(1)在ccRCC組織中，LncRNA TUG1的表達水平相比正常腎組織中明

6、顯上升，提示LncRNA TUG1表達升高可能與腎癌的發(fā)病、進展相關，臨床上檢測LncRNA TUG1的表達量可能有利于ccRCC的早期診斷；
　　(2) LncRNA TUG1的表達水平與腫瘤大小、福爾曼分級相關，提示其可用來預測腫瘤的TNM分期及腫瘤惡性程度；
　　(3) LncRNA TUG1可能是腎癌發(fā)展發(fā)展中起重要作用的癌基因，通過抑制LncRNA TUG1的表達或許將成為腎癌精準治療的新手段。
　　目的：提

7、高對睪丸惡性間質細胞瘤（TMLCT）臨床病理特征的認識及無創(chuàng)診斷水平方法:回顧分析1例TMLCT的臨床病理資料，檢測患者外周血循環(huán)腫瘤細胞（CTC）并進行文獻復習
　　結果:全麻下行根治性右睪丸腫瘤切除術。術后病理檢查顯示：睪丸惡性間質細胞瘤，以間質細胞為主，可疑脈管癌栓。免疫組化染色示：α-inhibin（+），vimentin部分（+），EMA（+），PLAP（+），CD30（+），Ki67約5%（+），CK（-）, CK7（

8、-），S100（-），CD10（-），SMA（-）,Des（-），AFP（-），HCG（-），CEA（-）CK19（-）,CD117（-）,Oct-4（-）,LCA（-）,CD20（-）,Pax-5（-）,CD3（-）,CD43（-）。患者外周血中共檢測到2個CTCs。術后復查因多發(fā)淋巴結轉移行化療3程，隨后復查CT見腹膜后淋巴結轉移無明顯縮小，予行腹膜后腫物切除+冷凍消融術。隨訪8個月復查CT見腹膜后轉移淋巴結較前增大并腎上腺轉移